EFECTOS RÁPIDOS DEL 1a,25(OH)2- VITAMIN D3 EN CÉLULAS INTESTINALES DE RATAS JÓVENES Y SENILES

ANA RUSSO DE BOLAND; VERONICA GONZALEZ PARDO

Quito

Congreso; S.I.B.O.M.M. VI Congreso de la Sociedad Iberoamericana de Osteología y Metabolismo Mineral; 2003

Sociedad Iberoamericana de Osteología y Metabolismo Mineral

En células intestinales (enterocitos), así como en otros tipos celulares, el 1,25(OH)2-Vitamina D3 [1,25(OH)2D3] desencadena respuestas rápidas y a largo plazo a través de mecanismos no-genómicos y genómicos, respectivamente. Existe evidencia indicando que vias de fosforilación en tirosina están involucradas en la respuesta del 1,25(OH)2D3 a través de su mecanismo no-genómico. En este trabajo evaluamos la participación de la hormona en la fosforilación en tirosina de PLCg  y MAPK  (ERK1/2) en enterocitos de ratas jóvenes (3 meses) y seniles (24 meses). Estudios inmunoquímicos revelaron que la hormona estimula la fosofrilación en tirosina de PLCg en animales jóvenes. El efecto de la hormona sobre PLCg  es muy rápido, con un pico a los  2 min (+170%), es dependiente de la dosis (10-11-10-8 M) y disminuye con el envejecimiento. 1,25(OH)2D3 también fosforila y activa a las proteinas quinasas activadas por mitógenos  ERK1(p42) y ERK2 (p44),  efecto que se evidencia al minuto (+300%) y es máximo a los  2 minutos (+600%). La fosforilación de ERK 1 y ERK2 dependiente de la hormona se reduce significativamente en enterocitos de ratas seniles. Tanto en animales jóvenes como en seniles, la fosforilación de PLCg  y de ERK1/2 inducida por el 1,25(OH)2D3 fue suprimida por genisteina (100uM), un inhibidor de tirosinas quinasas y por el inhibidor de c-Src quinasas PP1. Wortmannin y  LY294002, dos inhibidores estructuralmente distintos de la  PI3 quinasa (PI3K), enzima que desempeña un rol importante en mitogénesis, no afectaron la fosforilación de ERK1/2, indicando que PI3K no participa en la activación de MAPK inducida por el 1,25(OH)2D3. De acuerdo con estos datos, ensayos de actividad enzimática y de fosforilación de la subunidad regulatoria (p85) de PI3K mostraron que la hormona no modifica la actividad de la enzima en enterocitos de rata. Estos estudios demuestran que en células intestinales, la fosforilación en tirosina dependiente de c-Src quinasas es un importante mecanismo del 1a,25(OH)2D3  involucrado en la regulación de PLCg  y de MAPK y que este mecanismo se altera con el envejecimiento.