INHIBICIÓN DEL TRANSPORTE DE RODAMINA 6G POR EL FLAVONOIDE 6PP Y FLUCONAZOL EN Candida albicans.

PERALTA, MARIANA A.; CALISE MAXIMILIANO; ORTEGA, M. GABRIELA; FORNARI, M.C.; BERARDI, V; CABRERA, JOSE L.; DIEZ, ROBERTO; PEREZ, CRISTINA

MEDICINA (BUENOS AIRES)

MEDICINA (BUENOS AIRES)

Año: 2008 vol. 68 p. 93 - 93

0025-7680

Previamente demostramos la actividad antimicótica del 2´,4´-dihidroxi-5´-(1´´´,1´´´-dimetilalil)-6-prenilpinocembrina (6PP) sobre microorganismos multi-resistentes de origen nosocomial. Este flavonoide aislado de la leguminosa cordobesa Dalea elegans también inhibe enzimas mitocondriales generadoras de energía. Un mecanismo importante de resistencia es la expulsión de antimicrobianos mediada por transportadores, cuya inhibición incrementa la concentración intracelular de estos fármacos y consecuentemente revierte la resistencia. Dado que algunos flavonoides antimicrobianos son también inhibidores de transportadores, se evaluó el efecto del 6PP sobre el transporte de antimicóticos imidazólicos. Para ello, se midió la extrusión de rodamina 6G (Molecular Probes) en Candida albicans resistente a azoles. Esta cepa,  aislada de la cavidad bucal, fue donada por el Dr. T. White (Universidad de Washington, EE.UU.) y expresa transportadores de tipo CDR1, CDR2 y MDR1. Para medir la intensidad de emisión en FL1 en levaduras incubadas en presencia o ausencia de diferentes concentraciones de 6PP y fluconazol se empleó un citómetro de flujo Facscan (Becton-Dickinson). Los datos fueron analizados con Graphpad Prism (Graphpad Software, La Jolla, CA, EEUU). La fluorescencia espontánea de las levaduras equivale al 3 % de la generada por la rodamina retenida tras la primera incubación y el 11 % de la segunda. Entre 1 y 1.000 µM, tanto el 6PP como el fluconazol inhiben el eflujo de rodamina en forma dependiente de la concentración. Los datos experimentales pueden ajustarse a una función michaeliana cuyos parámetros, para el flavonoide y el antimicótico imidazólico, respectivamente, son: inhibición máxima: 45,46%  y 41,42%; KI aparente 42,95 µM y 107,81 µM. Los resultados son compatibles con la inhibición de uno o más transportadores de rodamina por 6PP y fluconazol y sugieren la necesidad de evaluar un eventual sinergismo del flavonoide prenilado con los imidazoles como antimicóticos.