Efecto de las inmunoglobulinas de aplicación intravenosa enriquecidas con IgM (IgIV-IgM) sobre la activación in vitro de los linfocitos T y las células leucémicas de los pacientes con Leucemia Linfática Crónica (LLC).

COLADO ANA; GAMBERALE ROMINA; BORGE MERCEDES

Mendoza

Congreso; XXIV Congreso Argentino de Hematología; 2019

Las inmunoglobulinas de aplicaciónintravenosa (IgIV) están recomendadas para pacientes LLC hipogammaglobulinémicoscon infecciones recurrentes (Hallek, M. et al. 2018). Además, la IgIV esutilizada en enfermedades autoinmunes o inflamatorias por su capacidadinmunomoduladora al ser administrada en altas dosis. En LLC, un trabajo recientesugirió que el uso de altas dosis de IgIV podría tener un efecto terapéutico, enparte por efectos regulatorios sobre las células leucémicas(Spaner, D et al, 2018). Mientras que la IgIV estándar contiene mayormente IgG,Pentaglobin es una IgIV enriquecida en IgM (IgIV-IgM) que se ha usado principalmenteen pacientes con sepsis (Jie, C. et al. 2019). La capacidad inmunomoduladora dela IgIV-IgM en LLC no ha sido estudiada.Evaluar en forma comparativa el efecto in vitro de IgIV e IgIV-IgM sobre lascélulas B leucémicas y los linfocitos T (LT) de los pacientes con LLC.Se utilizaron células mononuclearestotales de sangre periférica de pacientes con LLC. Los LT se activaron con anticuerposanti-CD3 o IL-15. A las 24h se evaluó la expresión de los marcadores deactivación CD25 y CD69 por citometría de flujo (CF). La proliferación sedeterminó mediante el ensayo de dilución de CFSE a los 5 días. Las células Bleucémicas se activaron con anticuerpos anti-IgM. A las 24h se evaluó laexpresión de los marcadores de activación CD69 y CD86 por CF. Se utilizó IgIVestándar o IgIV-IgM (Pentaglobin, Microsules) a una concentración de IgG de 10mg/ml o HSA como control. La viabilidad celular se analizó mediante CF. Para elanálisis estadístico se utilizó el Friedmantest y el Dunn?s post-test.La IgIV inhibió la activación de los LT delos pacientes (n=10, p<0,05) tal como está descripto para los LT de dadoressanos (MacMillan, H. et al. 2009). Llamativamente, la IgIV-IgM no afectó suactivación. Tanto la IgIV como la IgIV-IgM inhibieron la proliferación de los LTen respuesta a la estimulación a través del TCR, aunque la inhibición fue mayorcon IgIV (n=10, p<0.05). Por otro lado la IgIV, pero no la IgIV-IgM, inhibióla proliferación de los LT en respuesta a IL-15, una citoquina involucrada enla proliferación homeostática de las células T (n=11, p<0.05).En cuanto a las células leucémicas, laIgIV-IgM inhibió su activación a través del BCR (n=10, p<0.05) tal como estádescripto para la IgIV estándar. Además, la presencia simultánea de ibrutinibcon IgIV-IgM disminuyó aún más la expresión de CD69 (n=8, p<0.05). Finalmente,teniendo en cuenta que las células LLC expresan altos niveles del receptor deIgM, FcµR o TOSO, originalmente descripto como antiapoptótico, nos preguntamossi la IgIV-IgM podría inhibir la citotoxicidad inducida por venetoclax,encontrando que la IgIV-IgM no afectó la apoptosis inducida por venetoclax (n=8).Encontramos que la IgIV-IgM disminuyó laactivación in vitro de células LLC,sin afectar la activación de los LT, especulamos que estos efectos podríantener un efecto terapéutico beneficioso invivo.