Las células estromales de ganglios linfoides aumentan la sobrevida in vitro de linfocitos T y B

GABRIELA LORENA CAMICIA; DANIELA LORENZO; NOEL BADANO; ANDREA MAGLIOCO; NADEZDA SIACHOQUE; GABRIEL CABRERA; ISABEL PIAZZON; IRENE NEPOMNASCHY

Mar del Plata

Congreso; LIII Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica y Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Fisiología; 2008

SAIC-SAFIS

Los ratones mutantes para catepsina L (nkt) presentan altos números de linfocitos en los ganglios linfoides (GL) que correlacionan con aumentos en los niveles de glicoproteínas de la matriz extracelular (ECM) (Lombardi y col, JImmunol. 174:7022, 2005). Con el objeto de investigar la influencia del estroma de los GL en las poblaciones linfocitarias, seleccionamos células estromales (CE) -principales productoras de ECM- por cultivo a largo plazo de células adherentes de GL de ratones nkt (CEnkt) y wt (CEwt) (pasaje 11). La ausencia de marcadores de linaje endotelial, macrofágico y dendrítico (FACS), la morfología fibroblástica y la expresión de mRNA para gp38 (RT-PCR) sugieren la obtención de fibroblastos reticulares. Evaluamos la influencia de las CE en la sobrevida y proliferación linfocitaria in vitro cocultivando linfocitos de GL de ratones wt en presencia o ausencia de CE wt y nkt. Determinamos los porcentajes de apoptosis y proliferación por marcación con ioduro de propidio y análisis por FACS a 1, 2, 3 y 7 días de cocultivo. Aunque no se observaron diferencias en los porcentajes de proliferación, la presencia de CE disminuyó el porcentaje de apoptosis de células CD4+ y B220+, siendo mayor el efecto de las CEnkt. Ej. día 2 (media % hipodiploidía ±DS; n=3) células CD4+: CEnkt: 0,19±0,02; CEwt: 2,42±0,7; sinCE: 13,3±1,5; CEnkt vs sinCE y CEwt vs sinCE p