Citoquinas en células mononucleares de sangre periférica en enfermedades de almacenamiento lisosomal

DE FRANCESCO N; FOSSATI C; ROZENFELD P

La Falda, Córdoba, Argentina

Congreso; LVI Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Inmunología; 2008

Sociedad Argentina de Inmunología

Las enfermedades de Fabry (EF), Gaucher (EG) y Hunter (EH) son desórdenes  genéticos caracterizados por la deficiencia en la actividad de sendas enzimas lisosomales, la cual conduce a la acumulación del sustrato específico de cada caso. Si bien estas afecciones muestran evoluciones clínicas diferentes, con signos y síntomas propios de cada una, existen para todas ellas evidencias de la presencia de un estado proinflamatorio subyacente que podría explicar algunos aspectos de sus fisiopatologías. El objetivo del presente trabajo es analizar los niveles de expresión y secreción de diversas citoquinas en células mononucleares de sangre periférica (PBMC) de pacientes con estas enfermedades. Partiendo de muestras de sangre periférica de pacientes y de individuos normales, se aislaron PBMC por centrifugación en gradiente de Ficoll. Se determinó la concentración de IL-1β, IL-6, IFNγ , TNFα , IL-12, IL-4, IL-5, IL-10 e IL-13 en sobrenadantes de cultivos de PBMC, mediante ELISA de captura. También se analizó el nivel de expresión de los genes de IL-1α, IL-1β, IL-6, IFNγ y TNFα, mediante RT-qPCR, usando β-actina como estándar interno. Los resultados obtenidos se expresaron como fold-increase (FI) respecto de los controles normales.En los sobrenadantes de cultivo de PBMC de pacientes con EF se observó un aumento en la secreción de IL-1β e IL-6 estadísticamente significativo (p<0,05). También se evidenció un descenso de la secreción de IFNγ  en las muestras de las tres enfermedades, siendo estadísticamente significativo (p<0.05) para EG y EH. Se observó un leve descenso de IL-13 en las muestras de las tres enfermedades, siendo estadísticamente significativo (p<0,05) para EH. Se evidenció un aumento de IL-10 (p<0,05) en las muestras de EF, mientras que se observó una disminución en las de EH y EG, siendo estadísticamente  significativa en esta última (p<0,05). En muestras de EH también se observó una tendencia al aumento de IL-6 y TNFα, mientras que en muestras de EG se notó una tendencia al descenso de IL-1β e IL-6. En los resultados de RT-qPCR se observó una tendencia al aumento en la expresión de IL-1β, y TNFα  para las muestras de las tres enfermedades, así  como un ligero aumento en la expresión de IL‑6 para las muestras de EH y EG.En conjunto, estos patrones de producción de citoquinas en las tres enfermedades estarían en concordancia con un estado proinflamatorio presente en las patologías.