Marcadores de apoptosis en celulas mononucleares de sangre periférica de pacientes con enfermedad de Fabry

DE FRANCESCO N; PROCOPIO D; FOSSATI C; ROZENFELD P

Mar del Plata, Argentina

Congreso; LV Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Inmunología - XII Reunión de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2007

Sociedad Argentina de Inmunología - Sociedad Argentina de Investigación Clínica

La Enfermedad de Fabry (EF) es un desorden genético ligado al X causado por la deficiencia de la actividad de la enzima lisosomal α-galactosidasa A, que conduce a la acumulación intralisosomal de glicolípidos complejos en diferentes tejidos, siendo el más abundante la globotriaosilceramida, Gb3. En la actualidad, el tratamiento especifico consiste en el reemplazo enzimatico (ERT). Para explicar en parte su fisiopatología se ha sugerido la existencia de un estado proinflamatorio crónico, similar al hallado en otras enfermedades de acumulación lisosomal. El objetivo de este trabajo es analizar marcadores de apoptosis en células mononucleares de sangre periférica (PBMC) de pacientes con EF. Partiendo de muestras de sangre periférica de pacientes con EF, con y sin tratamiento de reemplazo enzimático (ERT), y de individuos normales, se estudió por citometría de flujo el estado de apoptosis, mediante las técnicas de Anexina V-FITC y TUNEL. Para la primera se utilizó sangre entera seguida de lisis de glóbulos rojos, y para la segunda, se aislaron PBMC por centrifugación en gradiente de Ficoll. Se distinguieron las diferentes subpoblaciones leucocitarias por sus características FSC-SSC, y se analizaron los valores de intensidad media de fluorescencia (MFI) y porcentaje de células con marcación positiva (%FITC+) de los ensayos en pacientes con EF, expresando ambas cifras como cociente respecto de las muestras normales. Se halló un aumento significativo respecto de la unidad (p<0,01) en %FITC+ para Anexina V en Granulocitos de pacientes con EF. Al comparar los resultados entre pacientes con y sin ERT, se observó una disminución de la MFI de Anexina en Linfocitos (p<0,05) asociada al tratamiento, observándose la misma tendencia en esta población en el %FITC+ de Anexina, y MFI y %FITC+ de TUNEL. Los resultados indicarían la existencia de un estado de apoptosis exacerbado, que revierte parcialmente con la administración de ERT.