INVESTIGADORES
DE FRANCESCO Pablo Nicolas
congresos y reuniones científicas
Título:
Producción de citoquinas proinflamatorias por tratamiento con Gb3 y DGJ en células dendríticas y macrófagos derivados de PBMC normales. Implicaciones para la fisiopatología de la Enfermedad de Fabry
Autor/es:
DE FRANCESCO P N; MUCCI J M; CECI R; ROZENFELD P A
Lugar:
Mar del Plata
Reunión:
Congreso; LVII Reunión Científica Anual SAIC - LX Reunión Científica Anual SAI 2012; 2012
Institución organizadora:
SAIC - SAI
Resumen:
La
enfermedad de Fabry (EF) es un desorden genético X-ligado, caracterizado por la
deficiencia en la actividad de la enzima lisosomal α-galactosidasa A (αGal),
que conduce a la acumulación de glicolípidos neutros, principalmente
globotriaosilceramida (Gb3). Se ha sugerido la existencia de un estado
proinflamatorio crónico como uno los factores de su fisiopatología. Resultados previos de nuestro grupo mostraron una producción y
expresión aumentada de citoquinas proinflamatorias en células mononucleares de
sangre periférica (PBMC) de pacientes con EF, y en particular en células
dendríticas (DC) y monocitos (M).
El objetivo del presente trabajo es investigar los
efectos del Gb3 y del DGJ, un inhibidor de αGal, sobre la producción de
citoquinas en DC y macrófagos (MΦ) derivados de PBMC normales.
Partiendo de buffy
coats normales, se aislaron PBMC por centrifugación en gradiente de ficoll,
y posteriormente se purificaron M por adhesión en cultivo de 1h. Los M
obtenidos se cultivaron por 6 días en presencia de GM-CSF e IL-4, o M-CSF, para
diferenciarlos a DC o MΦ, respectivamente. Se cultivaron luego las DC y MΦ
obtenidos por 24 hs en presencia o ausencia de Gb3 20µM y/o, DGJ 200µM, y se
analizaron los niveles de IL-β, IL-6 y TNF en los sobrenadantes.
Tanto en los cultivos de DC como de MΦ se observó un
aumento significativo en la producción de IL-1β y TNF, respecto del control, solo
si se trataba conjuntamente con Gb3 y DGJ, (DC p=0,0018 y p=0,0041; MC p=0,0002
y p=0,0054, respectivamente). Se observó una tendencia similar para la
producción de IL-6.
Estos resultados muestran que mediante el agregado
conjunto de Gb3 y DGJ en cultivos normales de las dos subpoblaciones estudiadas
se puede inducir un estado proinflamatorio similar al observado en PBMC de
pacientes con EF, lo que indicaría que los niveles elevados de Gb3 propios de la
EF están directamente implicados en la fisiopatogenia del estado
proinflamatorio en esta enfermedad.