ESTUDIO DE LOS MECANISMOS FISIOPATOGENICOS ASOCIADOS A LA PATOLOGIA ÓSEA EN ENFERMEDAD DE GAUCHER

MUCCI J M; SUQUELI GARCIA M F; DE FRANCESCO P N; SCIAN R; FOSSATI C A; DELPINO M V; ROZENFELD P

Mar Del Plata

Congreso; LV Reunión Científica Anual SAIC - Reunión Científica Anual SAFIS 2010 - XLII Reunión Científica Anual SAFE; 2010

SAIC - SAFIS - SAFE

La enfermedad de Gaucher (EG) es una patología genética de almacenamiento lisosomal, causada por la deficiencia de la enzima beta-glucosidasa (GBA). Las manifestaciones óseas incluyen osteopenia y osteonecrosis. En la EG se sabe que la inflamación es un factor clave en la patogénesis y se ha descripto un aumento de marcadores de resorción ósea mediada por osteoclastos tales como Catepsina K y TRAP. El objetivo es investigar si existe inducción de osteoclastogénesis en dos modelos in vitro de la EG, uno murino utilizando macrófagos de la línea celular J774 (M) y uno humano mediante empleo de células mononucleares de sangre periférica de individuos normales (H).Las células M y H se cultivaron en presencia de Conduritol β-epóxido (CBE), un inhibidor de la GBA, con el agregado de diferentes concentraciones de LPS y se midió la producción de IL-1β, TNF-α e IL-6 en los sobrenadantes de cultivo mediante ELISA. Se observó un aumento de la secreción de citoquinas en los cultivos H que contenían CBE y LPS con respecto a los que se trataron con LPS solo. En cambio, no se detectó diferencias apreciables para los cultivos M.Los sobrenadantes de los cultivos H y M se utilizaron para tratar cultivos de monocitos humanos de la línea THP-1 y cultivos de precursores de médula ósea en presencia de M-CSF, respectivamente. Se midió la inducción de osteoclastogénesis mediante la determinación de TRAP y MMP-9, y la expresión de los genes RANK, CTSK y CCL2 mediante qPCR.Se observó un aumento en la inducción de osteoclastogénesis para las células tratadas con sobrenadantes de células estimuladas con CBE con respecto a los controles y un aumento aun mayor cuando se trataron con aquellos que provenían de células estimuladas con CBE y LPS, en ambos modelos.Como conclusión, ambos modelos in Vitro de Enfermedad de Gaucher exhibieron un aumento en la inducción de osteoclastogénesis. El modelo humano, a diferencia del murino, mostró una respuesta inflamatoria más acentuada.