MODELO IN VITRO DE PATOLOGÍA ÓSEA DE ENFERMEDAD DE GAUCHER: ESTUDIO DEL ROL DE CITOQUINAS PROINFLAMATORIAS EN LOS MECANISMOS FISIOPATOGÉNICOS

MUCCI J M; DE FRANCESCO P N; SCIAN R; DELPINO M V; ROZENFELD P A

Mar del Plata

Congreso; LVI Reunión Científica Anual SAIC - Reunión Científica Anual SAFIS 2011 - Reunión Científica Anual AACYTAL 2011; 2011

SAIC - SAFIS - AACYTAL

La enfermedad de Gaucher (EG) es una patología genética de almacenamiento lisosomal, causada por la deficiencia de la enzima beta-glucosidasa (GBA). Las manifestaciones óseas incluyen osteopenia y osteonecrosis. Resultados previos revelaron secreción de citoquinas proinflamatorias e inducción de osteoclastogénesis por parte de los sobrenadantes de células de nuestro modelo in Vitro de EG (SC). El objetivo es analizar la presencia de mediadores de osteoclastogénesis en los SC y evaluar el papel del TNF-α en dicho proceso. PBMC de controles normales se cultivaron en presencia de Conduritol β-epóxido (CBE), un inhibidor de la GBA, con el agregado de LPS. Los SC se utilizaron para tratar cultivos de una línea de monocitos humanos en presencia de M-CSF. Se determinó la inducción de osteoclastogénesis mediante el conteo de células TRAP+ y la medida de osteólisis por recuento de sitios de resorción utilizando una matriz ósea comercial, en presencia de un anticuerpo neutralizante anti-TNF-α. Se observó un aumento en la cantidad de células TRAP+ multinucleadas y de sitios de resorción ósea en comparación con el control (p<0,05); ambos parámetros se redujeron en presencia del anticuerpo anti-TNF-α (p<0,05). En los sobrenadantes de cultivo de los osteoclastos diferenciados, se reveló un aumento significativo de IL-1β, TNF-α e IL-6, aumento en la actividad metaloproteasa (MMP) neta medida por degradación de gelatina fluorescente, así como también aumentos en los niveles de quitotriosidasa, biomarcador utilizado en Enfermedad de Gaucher. Concluimos que el modelo de EG muestra niveles aumentados de osteoclastogénesis lo que podría contribuir a los problemas óseos presentes en la enfermedad y que uno de los mediadores responsables de dicho aumento sería la citoquina TNF-α. Por otro lado, también se observó que esta citoquina puede ser producida por los osteoclastos diferenciados dando lugar a un aumento en la osteoclastogénesis.