Estudio del mecanismo de acción de progesterona en sistema vascular: regulación de procesos celulares y moleculares

CUTINI P.; MASSHEIMER V.

Jornada; Primeras Jornadas Bioquímicas del Sudoeste Bonaerense - Desde lo molecular a la clínica. II taller sobre la problemática del Profesional Bioquímico egresado de la Universidad Nacional del Sur; 2009

La regulación de la apoptosis, proliferación y migración de células endoteliales (CE) y musculares lisas vasculares (CMLV) es de fundamental importancia para la homeostasis vascular. Estos eventos bioquímicos-celulares son regulados por diferentes factores y hormonas, entre ellas, el esteroide sexual progesterona (Pg), e implican la participación de segundos mensajeros intracelulares. El objetivo del trabajo fue investigar el efecto de Pg sobre la regulación de estos procesos en cultivos de CE y CMLV de origen murino obtenidas por cultivo primario. Evaluamos el efecto de Pg sobre apoptosis de CMLV midiendo fragmentación de ADN. El tratamiento con Pg (10nM) indujo una mayor fragmentación respecto al control (55%,88% ADN fragmentado/total;Control,Pg;p menor a 0.05). El pre-tratamiento con Pg no modifica la acción del H2O2 1mM (inductor de apoptosis), el cual produjo la máxima fragmentación. Llevamos a cabo ensayos de migración para estudiar si Pg afecta la motilidad de CE y CMLV. Luego de 48h de tratamiento hormonal observamos un estímulo significativo de la migración en ambos tipos celulares (115%;129% sobre/control,CE;CMLV,p menor a 0.05). Empleando la técnica de incorporación de [3H]-timidina, estudiamos el efecto de Pg sobre la proliferación de CE y CMLV. Vimos que 24h de tratamiento con Pg suprime el crecimiento de CE (63% inhibición;p menor a 0.02), mientras que ejerce un efecto proliferativo sobre CMLV (43% sobre/control;p menor a 0.001). Previamente demostramos que, en tejido vascular, Pg activa rápidamente las vías mensajeras de PKC y MAPK. Estudiamos si el efecto de Pg sobre proliferación está relacionado con estas vías. Utilizando los inhibidores selectivos Chelerythrine (PKC) y PD98059 (MAPK), observamos una supresión total de los efectos del esteroide para ambas vías mensajeras en sendos tipos celulares (Pg vs Pg+inhibidores;p menor a 0.001). Concluimos que Pg regula los procesos de apoptosis, migración y proliferación de CE y CMLV. En el estudio de proliferación, el mecanismo de acción hormonal involucra la participación de las vías mensajeras de PKC y MAPK.