Rol de los esteroides ováricos progesterona y estrona sobre alteraciones vasculares inducidas en procesos inflamatorios

CUTINI P.; RAUSCHEMBERGER M.B.; MASSHEIMER V.

Congreso; LIV Reunión Científica anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC) - Reunión Científica de la Sociedad Argentina de Inmunología (SAI); 2009

La inducción de moléculas de adhesión en células endoteliales (CE), estimulación de la apoptosis y migración de células musculares lisas vasculares (CMLV), son respuestas del lecho vascular en situaciones de estrés oxidativo ó inflamación. Estos eventos son regulados por numerosos factores y hormonas, entre ellas los esteroides sexuales. El objetivo fue investigar el efecto de progesterona (Pg) y estrona (E1) sobre los procesos celulares mencionados en cultivos primarios de CE y CMLV murinos. Se estudió el efecto de Pg y E1 sobre apoptosis midiendo fragmentación de ADN (geles de agarosa o marcación con [3H]-timidina). El tratamiento con Pg 10nM indujo una mayor fragmentación respecto al control (55%,88% ADN fragmentado/total;Control,Pg;p menor a 0.05), mientras que no se observaron cambios con E1 10nM. El inductor de apoptosis H2O2 (1mM) produjo la máxima fragmentación. Si las células se tratan con E1 previo al agregado del H2O2, este efecto se revierte parcialmente (92%,45% ADN fragmentado/total;H2O2,E1+H2O2;p menor a 0.05). El tratamiento con Pg no modifica la acción del H2O2. Empleando la técnica de RT-PCR se evaluó el efecto de E1 y Pg sobre los niveles de ARNm de las moléculas de adhesión VCAM-1, P-selectina y E-selectina en CE. Como control de expresión se usó GAPDH. Las CE se trataron 24 h con el agente proinflamatorio LPS (lipopolisacárido bacteriano), E1 ó Pg. El LPS (1μg/ml) elevó los niveles de ARNm de las moléculas estudiadas (3 veces/basal), mientras que el tratamiento con E1 y Pg no exhibe cambios respecto al control. En presencia de las hormonas se suprime el efecto del LPS. Realizamos ensayos de migración para estudiar si las hormonas afectan la movilidad de CMLV. Tratamientos con Pg ó E1 estimularon significativamente la migración (105±9;264±22;240±18 células/campo, C;E1;Pg, p menor a 0.001). Estos resultados muestran una acción diferencial y selectiva de E1 y Pg sobre los procesos de apoptosis, migración celular e inducción de moléculas de adhesión en tejido vascular.