Mecanismo de acción de progesterona y su análogo sintético acetato de medroxiprogesterona a nivel vascular

CUTINI P.; MASSHEIMER V.

Salta

Congreso; IX Congreso de la Federación Argentina de Sociedades de Endocrinología (FASEN); 2012

En situaciones de injuria vascular, la respuesta inicial al daño es una disminución de la síntesis del agente vasoactivo óxido nítrico (NO) y un aumento de la adhesión de plaquetas y macrófagos activados por el ambiente inflamatorio generado. Uno de los principales mecanismos de defensa de la pared vascular es la reendotelización, proceso que depende de la migración y movilización de células endoteliales (CE) al sitio de la lesión. El sistema vascular es un tejido diana de numerosos factores y hormonas, entre ellas el esteroide sexual progesterona (Pg). La terapia de reemplazo hormonal (TRH) basada en estrógenos o en combinación con progestágenos se propone como alternativa terapéutica con efectos cardioprotectores en mujeres postmenopáusicas. Está en debate aún si la administración conjunta de progestinas sintéticas, como acetato de medroxiprogesterona (MPA) a la terapia estrogénica, mejoraría la eficacia de la terapia a nivel vascular. Previamente demostramos en nuestro laboratorio que Pg estimula la producción de NO a través de un mecanismo de acción que involucra la participación del PgR y las vías mensajeras de MAPK y PI3K. Objetivo: evaluar acciones celulares y moleculares de MPA a nivel vascular y contrastarlas con las descriptas para Pg. Metodología y resultados obtenidos: como sistema experimental empleamos CE obtenidas por cultivo primario de explantes a partir de anillos de aorta de ratas Wistar. Utilizando el método de Griess, investigamos si MPA regula la síntesis de NO. Observamos que el tratamiento con MPA (1-100nM) inhibió marcadamente la producción del vasoactivo con respecto a la condición control (32.3±3.3 vs 19.4±2.0 nmol NO/mg proteína; control vs MPA 10nM respectivamente; p menor a 0.05). Estudiamos la contribución del receptor de Pg y las vías mensajeras de PKC, MAPK y PI3K en este efecto. La presencia de un antagonista del receptor de Pg, el compuesto RU486, suprimió totalmente el efecto inhibitorio de MPA. Por otro lado, si se bloquean las vías mensajeras de MAPK y PI3K preincubando las células con los inhibidores selectivos PD98059 y wortmaninna, se anula la inhibición sobre la síntesis de NO inducida por MPA. Sin embargo, la inhibición de la vía PKC con el compuesto chelerythrine no modificó el efecto de la progestina. Evaluamos el efecto de Pg y MPA sobre la migración de CE. Realizando ensayos de wound-healing, demostramos que, si bien ambos progestágenos estimularon significativamente la movilidad de CE, el efecto de MPA fue mucho más potente que el ejercido por Pg. El tratamiento con MPA (1-100nM) incrementó la migración entre un 753 y 1420% sobre el grupo control (p menor a 0.001) mientras que en el mismo rango de concentraciones, Pg produjo un estímulo marcadamente inferior (39-150% sobre el control, p menor a 0.01). Estudiamos el efecto de los progestágenos sobre la adhesión de plaquetas a CE utilizando el agente proinflamatorio LPS (lipopolisacárido) como inductor de adhesión. El tratamiento con LPS (1μg/mL) indujo un marcado estímulo sobre la adhesión plaquetaria (66% sobre el grupo control, p menor a 0.001). El agregado previo de Pg, suprimió totalmente el efecto del LPS (43.4±3.0, 72.1±4.3, 45.1±3.4 plaquetas adheridas (x103)/mL; control, LPS, Pg 10nM+LPS respectivamente; p menor a 0.005). En cambio, la adhesión de plaquetas inducida por LPS se potenció en CE pretratadas con la progestina MPA (23% sobre LPS, p menor a 0.005). Conclusión: los resultados obtenidos aportan evidencia de que, si bien a nivel molecular, Pg y MPA comparten vías de señalización intracelular, ambos esteroides impactan de manera diferente y con acciones antagónicas sobre procesos claves de la homeostasis vascular.