Interacción monocitos-plaquetas-endotelio: regulación por esteroides ováricos

SANDOVAL M.; CUTINI P.; CAMPELO A.; RAUSCHEMBERGER M.B.; MASSHEIMER V.

Mar del Plata

Congreso; LVI Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC)-Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Fisiología (SAFIS)-II Congreso Nacional y IV Reunión Científica Regional por el Bienestar del animal de Laboratorio; 2011

En este trabajo investigamos la acción de los esteroides ováricos progesterona (Pg), testosterona (T) y estrona (E1) en la interacción de monocitos-plaquetas-endotelio. Estudiamos la adhesión de monocitos (Am) y de plaquetas (Ap) al endotelio vascular en condiciones basales o frente a estímulos inflamatorios. Empleamos células endoteliales (CE) obtenidas por cultivo primario a partir de aorta de ratas Wistar. Para la Am, las CE fueron tratadas con los esteroides (24 hs) en presencia o ausencia de LPS, y luego incubadas con una suspensión de monocitos. En condiciones basales, E1 inhibió la Am (31% s/c, p menor a 0.01), en cambio los restantes esteroides no mostraron diferencias respecto al control. Como la Am o la Ap dependen de la expresión de moléculas de adhesión (CAMs), empleando RT-PCR evaluamos el efecto de los esteroides sobre la expresión de CAMs endoteliales. En concordancia con los resultados de Am, los esteroides redujeron los niveles de ARNm de ICAM-1. Empleando citometría de flujo demostramos que en monocitos, el tratamiento con E1 inhibió un 38% (p0.01) la expresión de CD11b (integrina alfaM que une con ICAM-1). En CE tratadas con LPS, E1 y Pg revirtieron la Am inducida por LPS (24±2.8;23±2.9vs38±3.1 monoc./cpo, Pg;E1vsLPS, p menor a 0.01). En los estudios de Ap, las plaquetas se adicionaron sobre CE en monocapa e incubadas 24 hs con las hormonas, en presencia o ausencia de trombina. En condiciones basales, Pg disminuyó un 20% la Ap (p menor a 0.05), T no indujo cambios significativos y E1 la incrementó en un 38% (p menor a 0.05). Los niveles de ARNm de P-selectina (CAM endotelial que media la Ap) aumentaron en el grupo tratado con E1 respecto al control. La Ap inducida por trombina fue significativamente inhibida por el pretratamiento con las hormonas (p menor a 0.05). Estos resultados sugieren que los esteroides gonadales modulan la interacción de los elementos formes sanguíneos con el endotelio vascular, con una marcada tendencia a atenuar la disfunción endotelial inducida por la inflamación.