Los cambios en la concentración extracelular de calcio y fósforo afectan la homeostasis de las células vasculares.

SANDOVAL M.; RAUSCHEMBERGER M.B.; DORRONSORO A.; CUTINI P.; SANTILLÁN G.; MASSHEIMER V.

Congreso; XXX Reunión Anual de la Asociación Argentina de Osteología y Metabolismo Mineral (AAOMM); 2013

Se ha descripto recientemente que las células vasculares (endoteliales y musculares lisas) expresan el sensor de calcio (CaR), receptor perteneciente a la superfamilia de proteínas G, que detecta cambios en la concentración de calcio en el orden milimolar. La disminución de la expresión del CaR favorece la calcificación vascular (CaV). El aumento del fósforo (P) sérico es otra de las principales causas de CaV principalmente en pacientes con enfermedad renal crónica. Disturbios en Ca o P séricos promueven la CaV por mecanismos independientes y/o por vías comunes. Nos propusimos estudiar el efecto del Ca y el P sobre procesos celulares vitales para la homeostasis vascular. Se empleó tejido aórtico intacto (anillos) o cultivos primarios de células endoteliales (CE) y musculares lisas (CMLV) aislados de aorta de ratas Wistar hembras. Se estudiaron los cambios metabólicos y fenotípicos de las células vasculares en un entorno procalcificante inducido por P o la combinación Ca/P. Evaluamos la transdiferenciación de la CMLV a linaje ostreoblástico (OB) partiendo del concepto de que tanto la CMLV como el OB se diferencia a partir de una misma célula mesenquimal pluripotencial. Se cultivaron CMLV durante 25 días con glicerofosfato (GP) 10 mM y se midió la actividad fosfatasa alcalina (FAL) como marcador de diferenciación osteoblástica y el contenido de Ca. Los niveles de actividad FAL y el contenido de Ca fueron significativamente mayores comparados CMLV nativas (FAL: 280±31 vs. 34±1,8 UI/mg de proteína y Ca: 45±6,6 vs. 28±1,9 mg/mg de proteína). Cuando las CMLV se incubaron en un medio que contenía Ca y P (Ca 4mM+ GP 5mM), se detectó un efecto sinérgico de la calcificación con respecto al uso de GP solo (FAL: 438±35 UI/mg de proteína; Ca: 71±8,8 mg/mg de proteína). La presencia de depósitos de Ca se corroboró por tinción con rojo de alizarina. Como control positivo se empleó la determinación de FAL en preosteoblastos de calvaria de rata. Sabiendo que la homeostasis vascular depende principalmente de la capacidad de producción de óxido nítrico (NO) por el endotelio vascular, vasoactivo que inhibe la CaV, estudiamos el impacto del entorno procalcificante sobre la producción de NO. Las elevadas concentraciones de Ca (3 y 5 mM) redujeron la biodisponibilidad de NO respecto de condiciones fisiológicas (1mM Ca) (48% y 44% disminución con respecto al control, respectivamente). Resultados similares se obtuvieron en anillos de aorta. Se observó un notorio descenso de NO en todas las concentraciones de Ca ensayadas (0,69±0,1; 0,91±0,15; 0,96±0,19; 1,35±0,27 vs. 2,55±0,51 nmol NO/mg de proteína; 2, 3, 4 y 5 vs. 1 mM Ca). Estudiamos si el aumento del Ca afecta la capacidad del tejido de responder a su agonista natural acetilcolina (ACh), activador endógeno de la óxido nítrico sintasa (NOS). La acción estimulatoria de ACh sobre la producción de NO (58% s/c, p