Células de Leydig de ratones machos híbridos con fusiones Robertsonianas presentan características inmunohistoquímicas y ultraestructurales de apoptosis

DÍAZ DE BARBOZA, G; RODRÍGUEZ, V; MALDONADO, C; PONCE, R; THEILER, G

Mar del Plata

Congreso; LVI Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica, Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Fisiología 2011 y el II Congreso Nacional de la Asociación Argentina de Ciencia y Tecnología de Animales de Lab; 2011

Previamente demostramos que ratones Graomys híbridos con rearreglos Robertsonianos presentan arresto de la espermatogénesis por apoptosis masiva de células germinales, lo cual explica su esterilidad. La testosterona sérica se encuentra disminuida en estos ratones con respecto a los controles. Por este motivo nos propusimos estudiar la presencia de apoptosis en las células de Leydig que sintetizan esta hormona esteroidea. El proceso apoptótico se determinó mediante la técnica de TUNEL, inmunolocalización de Bax, citocromo c, Fas, FasL y por microscopía electrónica, tanto en ratones híbridos como en sus parentales. Las células intersticiales de ratones híbridos fueron negativas tanto para TUNEL como para la inmunoexpresión de Bax y de citocromo c; sin embargo, mostraron la presencia de Fas y FasL. La frecuencia de las células Fas(+) incrementó con la edad, mientras que la inmunotinción de FasL se presentó elevada con respecto a los controles en todos los tiempos estudiados. El análisis ultraestructural de células de Leydig en los ratones controles adultos mostró la clásica presencia de mitocondrias de crestas tubulares y de inclusiones lipídicas, sustrato necesario para la esteroidogénesis. En cambio, las células de Leydig de los ratones híbridos de la misma edad presentaron vacuolas parcial o completamente vacías. Además, las mitocondrias revelaron pérdida de las crestas tubulares y aumento del espacio intramitocondrial. La cromatina y la envoltura nuclear mostraron ultraestructura normal sin signos compatibles con fragmentación nuclear. Los resultados revelan células de Leydig con características inmunohistoquímicas y ultraestructurales de una etapa temprana de la apoptosis como lo demuestra la elevada expresión de Fas y FasL, la alteración mitocondrial y la ausencia de la fragmentación del ADN. En estas condiciones las células no podrían producir testosterona en forma adecuada y favorecerían al arresto de la espermatogénesis.