- Cinética de inducción del interferón tipo I (IFN-I) en la infección con el virus Saint Louis encephalitis (SLE)

MARÍA ELISA RIVAROLA; ALBRIEU LLINÁS G; CONTIGIANI MS; ADRIANA GRUPPI

Congreso; XXXVIII Reunión Anual - Sociedad Argentina de Virología; 2018

Sociedad Argentina de Virología

El virus St. Louis encephalitis (SLEV, Flavivirus, Flaviviridae) es un arbovirus ampliamente distribuido en América. En Argentina ha remergido como un patógeno del sistema nervioso central desde el año 2002 causando brotes de encefalitis. En nuestro laboratorio, estudiamos la virulencia de la cepa epidémica CbaAr-4005, aislada de un brote ocurrido en Córdoba en el año 2005, y observamos que es más virulenta que otras cepas no epidémicas. Demostramos, en modelo murino, que esa virulencia podría estar asociada a una mayor capacidad de replicación en órganos periféri os y a la capacidad de invadir, replicar e inducir degeneración y muerte a nivel del sistema nervioso central (SNC). Creemos que el sistema inmune del hospedador es un factor clave que condiciona la capacidad neuroinvasia del virus. Por ello, trabajamos con animales deficientes endistintas células y moléculas de la inmunidad innata y adaptativa y demostramos que la respuesta del interferón tipo I (IFN-I, IFN-α y sus subtipos e INF-β)limita la replicación inicial de la cepa CbaAr-4005 en órganos periféricos, su ingreso al SNC y su patogenicidad. Nos propusimos entonces, identificar in vivo la cinética de inducción del IFN-I. Para identificar aquellos órganos/tejidos productores de IFN-I, un grupo de ratones productores de INF-β reporteros para el gen de la luciferasa (IFN-β +/βΔluc) fue inoculado y a distintos tiempos post-infección (de 24 a 96h), y se extrajeron distintos órganos periféricosy cerebro. Como control se utilizó un grupo de animales inoculados con PBS. Cada animal fue perfundido con PBS y posteriormente cada órgano fue homogeneizados en buffer de lisis reportero utilizando un equipo FastPrep-24 (MP). Posteriormente a cada lisado se le agregó LARII (Promega). La medición de la actividad de luciferasa se realizó utilizando un Luminómetro (Berthold). Los resultados se expresaron como Unidad Relativa de Luminiscencia/gramo (URL/gr). Estos experimentos se realizaron en un BSL3 en el Helmholtz Centre for Infection Research, Alemania. La cuantificación de la actividad relativa de la luciferasa en general reveló una respuesta de IFN-β a partir de las primeras 24 horas post-infección en distintos órganos murinos, siendo los principales productores el bazo y el timo. Estos resultados constituyen un importante antecedente de lainmunología asociada a SLEV, y sugieren que el IFN-I podría cumplir un rol importante en el control de la infección contra SLEV. El estudio detallado de larespuesta inmune ante esta infección resulta fundamental para entender los mecanismos de neuroinvasión del SLEV. Además, permitirá contar con una base empírica sólida y necesaria a la hora de evaluar terapias antivirales tendientes a mitigar las complicaciones neurológicas en pacientes susceptibles y de considerar posibles sinergias antigénicas con otros representantes del género Flavivirus.