Vectores baculovirales como herramienta de terapia génica para el tratamiento del cáncer cerebral

GARCIA FALLIT, MATÍAS; PIDRE, MATÍAS LUIS; ASAD, ANTONELA S.; PEÑA AGUDELO, JORGE A.; SAGRIPANTI SOFÍA; NICOLA CANDIA, ALEJANDRO JAVIER; PÉREZ KUPER, MELANIE; MARCHESINI, ABRIL; AMORÓS MORALES, LESLIE C.; GONZALEZ, NAZARENO; SEILICOVICH, ADRIANA; VERA, MARIANA B.; VIDELA-RICHARDSON, GUILLERMO A.; ZANETTI, FLAVIA A.; CANDOLFI, MARIANELA

Congreso; XXXV Jornadas multidisciplinarias de Oncología del Instituto de Oncología "Ángel H. Roffo"; 2022

Introducción y antecedentesLosglioblastomas (GBM) son los tumores cerebrales primarios malignos másfrecuentes y agresivos en adultos para los que no existenalternativas terapéuticas eficaces. Los vectores adenovirales (AdV)recombinantes son el estándar de oro para la terapia génica enneuro-oncología. Sin embargo, son muy inmunogénicos y virtualmentetoda la población presenta inmunidad preexistente anti-AdV, lo queconduce a una expresión transgénica transitoria. Los vectoresbaculovirales (BV) son patógenos de insectos, pero también puedentransducir células de otras especies. Su ventaja es que no se hareportado hasta el momento inmunidad preexistente contra BV en sereshumanos.ObjetivosConel fin de desarrollar estrategias terapéuticas para el tratamientodel GBM evaluamos la eficiencia de transducción de BV así como suposible neurotoxicidad y las comparamos con las de AdV. Nuestrahipótesis es que los BV constituyen una herramienta útil para laexpresión persistente de transgenes terapéuticos para eltratamiento del GBM.Materialesy MétodosConstruimosAdV y BV codificantes para proteínas fluorescentes bajo el controldel promotor del citomegalovirus (CMV). La eficiencia de transducciónde estos vectores fue evaluada en cultivos de astrocitos, líneascelulares de GBM y cultivos cortos derivados de biopsias de GBMmediante microscopía y citometría de flujo.Paraevaluar la eficiencia de transducción invivo y la neuropatología, losvectores se inyectaron mediante cirugía estereotáctica en elcerebro de ratones naïvey portadores de GBM.ResultadosObservamosque si bien la eficiencia de transducción de los AdV es mayor encélulas de rata y ratón, ambos vectores tienen eficiencias muysimilares en células de GBM humano. Ambos vectores tuvieron altacapacidad para transducir cultivos de astrocitos normales de rata yratón.Laeficiencia de transducción en cerebro de ratones naïvefue comparable con ambosvectores, así como la infiltración inmune en el sitio de inyección,sin signos evidentes de neurotoxicidad. Observamos que los BVtransducen células de GBM y astrocitos invivo. La expresión de laproteína reportera en cerebro fue estable durante 21 días enratones naive, pero se redujo notablemente en ratones preinmunizadosen forma sistémica contra BVs.ConclusionesConcluimosque los BV podrían constituir una herramienta útil para laexpresión de transgenes terapéuticos en el tratamiento del GBM. p { line-height: 115%; text-align: left; orphans: 2; widows: 2; margin-bottom: 0.25cm; direction: ltr; background: transparent }