OBTENCIÓN Y CARACTERIZACIÓN DE BACULOVIRUS RECOMBINANTES CON POTENCIAL TERAPÉUTICO CONTRA ADENOCARCINOMA DE PULMÓN.

MARCHESINI ABRIL; GÓMEZ BERGNA SANTIAGO MANUEL; AMORÓS MORALES LESLIE C.; GOTTARDO MARÍA FLORENCIA; ROMANOWSKI VÍCTOR; PIDRE MATIAS LUIS

Congreso; XIII Congreso Argentino de Virología; 2021

Los baculovirus son virus específicos de artrópodos que poseen lacapacidad de transducir células de mamífero y por ello pueden serutilizados como vectores de terapia génica.Los Inhibidores de la apoptosis (IAP) juegan un rol central en eldesarrollo y agresividad de diferentes tumores. En particular, lasobreexpresión de BIRC6, está asociada con un mal pronósticoen diferentes tumores y la resistencia a terapias convencionales.Nuestro objetivo fue seleccionar un posible blanco terapéutico através de un análisis transcriptómico de las IAP, y desarrollar vectoresde terapia génica basados en baculovirus para el tratamientode adenocarcinoma de pulmón (LAC).Se analizó la expresión de las 7 IAP en dos bases de datos diferentesde TCGA (The Cancer Genome Atlas). Al menos dos IAP(BIRC5 y BIRC6) tienen una expresión mayor en tejido tumoral(ANOVA). Además, al analizar la variación en el número de copiasde birc6 encontramos un incremento en pacientes recurrentesy tratados con radioterapia (χ2).Realizamos estudios de Gene Ontology y Pathway EnrichmentAnalysis y observamos que BIRC6 estaría involucrado en la vía deDDR (DNA damage response). Además, evaluamos los niveles deexpresión de genes en esta vía observando una sobreexpresión delos genes activadores de la DDR, en las muestras de LAC con altaexpresión de BIRC6.A continuación, diseñamos tres shRNAs que reconocen comoblanco diferentes regiones del gen birc6. Luego, generamos tresbaculovirus recombinantes (recBV). Evaluamos la eficiencia del silenciamientoen la línea celular A549 (LAC) mediante inmunofluorescenciay citometría de flujo y analizamos la inducción de apoptosismediante la técnica de TUNEL. Uno de nuestros recBV fuecapaz de silenciar BIRC6 e inducir un 30% de apoptosis en lascélulas A549 tratadas (t-test).Estos resultados abren el camino a futuros ensayos preclínicospostulando a BIRC6 como un nuevo blanco terapéutico, y a nuestrorecBV como un posible vector de terapia génica contra LAC.