OBTENCIÓN DE BACULOVIRUS DE ANTICARSIA GEMMATALIS RECOMBINANTES EXPRESANDO UNA TOXINA DE INSECTOS Y EVALUACIÓN DE SU CAPACIDAD BIOINSECTICIDA

SANTIAGO HAASE; MARÍA LETICIA FERRELLI; RICARDO SALVADOR; MATIAS LUIS PIDRE; MARCELO BERRETTA; ALICIA SCIOCCO CAP; VÍCTOR ROMANOWSKI

Congreso; Congreso Argentino de Virología 2011; 2011

Los bioinsecticidas constituyen una de las herramientas más convenientes para desarrollo de una agricultura sustentable, debido a su escaso grado de impacto ambiental. Entre los candidatos a bioinsecticidas, los baculovirus representan una alternativa promisoria, debido a su alta virulencia y especificidad. El nucleopoliedrovirus de Anticarsia gemmatalis, AgMNPV, es el virus más utilizado como bioinsecticida y es aplicado para el control de su hospedador, Anticarsia gemmatalis (la oruga de las leguminosas), una importante plaga de la soja. Sin embargo, en regiones templadas presenta algunas desventajas, entre ellas, el tiempo de acción relativamente lento. Esto ha motivado el desarrollo de AgMNPV recombinantes con modificaciones destinadas a disminuir el tiempo de acción del virus. La estrategia de modificación genética del virus se basa en la doble recombinación homóloga entre el genoma viral linealizado y un vector de transferencia que contiene el gen de la proteína a expresar bajo el control del promotor viral de poliedrina. El objetivo de el trabajo consistió en la generación de AgMNPV recombinantes que expresen una toxina específica de insectos (TxP-I, producto del gen tox34), proveniente del ácaro Pyemotes tritici. Se disponía de un virus recombinante que expresa la toxina TxP-I pero que no expresa la poliedrina y por lo tanto no resulta infectivo al ser administrado por vía oral. Este virus fue utilizado para la evaluación de la actividad biológica de TxP-I mediante la inyección de larvas de Anticarsia gemmatalis. Posteriormente, se desarrolló un vector de transferencia capaz de permitir la obtención de recombinantes infectivos por vía oral, en el cual se introdujo el ORF de tox34, y se generó el baculovirus AgMNPV-tox34-polh+. Se analizó la expresión de la proteína recombinante mediante SDS-PAGE y se analizó la actividad biológica de TxP-I a través de la administración intrahemocélica a larvas del hospedador. Finalmente, con el fin de analizar el potencial biotecnológico del virus generado, se realizó un bioensayo por administración oral comparando los parámetros bioinsecticidas de AgMNPV-tox34-polh+ con el virus salvaje.