Diseño y fabricación de micropatrones proteicos mediante técnicas de litografía

CECILIA R. PRUDKIN SILVA; VANESA M. DOUNA; CATALINA VON BILDERING; MARÍA C. MARCHI; LÍA I. PIETRASANTA

Malargüe

Conferencia; Reunión Anual de la Asociación Física Argentina (AFA); 2010

Asociación Física Argentina (AFA)

Las técnicas para la localización controlada de proteínas sobre superficies sólidas a escala micrométrica resultan de gran interés, en particular para el estudio de procesos biológicos. Con este fin, pusimos a punto la técnica de impresión por microcontacto, que consiste en la transferencia de moléculas desde un sello blando hacia un sustrato sólido por contacto entre ellos. Elaboramos los sellos con el precursor polimérico líquido PDMS (polidimetilsiloxano). Para ello, fabricamos un molde mediante litografía por haz de electrones sobre una película de PMMA (polimetilmetacrilato) depositada sobre silicio, cuyo espesor optimizamos y caracterizamos por microscopía de fuerza atómica (AFM). Diseñamos la matriz de PMMA (y a partir de ella el sello) especialmente para nuestra aplicación; la misma consta de un arreglo micrométrico de formas variadas. Con el sello de PDMS, imprimimos patrones organizados de la proteína estreptavidina sobre oro recocido, para usarlos como sistemas de estudio en espectroscopía de fuerza. Comparamos dos estrategias de unión de las proteínas al oro: por contacto directo (sello embebido en solución de proteínas) o a través de moléculas de tioles como puente covalente (sello embebido consecutivamente en solución de proteínas y de tioles). Evaluamos la calidad de los patrones resultantes en términos de homogeneidad, geometría y estabilidad mediante AFM. En este trabajo describimos en detalle las técnicas utilizadas y presentamos los resultados obtenidos.