LA PROTEÍNA HSP83 DE Leishmania infantum USADA COMO CARRIER MEJORA LA EXPRESIÓN DEL ANTÍGENO SAG1 DE Toxoplasma gondii EN PLANTAS

ALBARRACÍN, RM; LAGUÍA BECHER, M; FARRAN, I; SANDER, VA; CORIGLIANO, MG; YÁCONO, ML; PARIANI, S; SANCHEZ-LOPEZ, EDWIN; VERAMENDI, J; CLEMENTE, M

Buenos Aires

Congreso; XXVII Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Protozoologia; 2015

Sociedad Argentina de Protozoologia

SAG1 es el principal antígeno de superficie del parásito intracelular Toxoplasma gondii, que ha sido propuesto como uno de los principales candidatos para el desarrollo de una vacuna anti T. gondii. En este sentido es que se han realizado grandes esfuerzos por expresar este antígeno en diferentes sistemas heterólogos, que en la mayoría de los casos resultaron en bajos niveles de expresión y baja antigenicidad de la proteína recombinante. En el presente trabajo nos propusimos explorar la tecnología de transformación de cloroplastos con el objeto de optimizar la expresión SAG1 en plantas. Además, con el propósito de mejorar la expresión de SAG1 en cloroplastos, se expresó la proteína de choque térmico de 83kDa de Leishmania infantum (LiHsp83) como carrier del antígeno SAG1. Los niveles de SAG1 en plantas fue entre 0,1-0,2 g/g de peso fresco (PF). Por su parte, la fusión de SAG1 a LiHsp83 incremento significativamente los niveles de expresión de SAG1 en cloroplasto (~100 g/g de PF). Además, se evaluó la funcionalidad de la proteína fusión LiHsp83-SAG1. Tres sueros seropositivos de pacientes reaccionaron contra la proteína SAG1 presente en plantas que expresaban la proteína de fusión LiHsp83-SAG1. Asimismo, las inmunizaciones orales de ratones C57 utilizando extractos de plantas que expresaban LiHsp83-SAG1 redujeron significativamente el número de quistes, que correlacionó con un aumento en los niveles de anticuerpos específicos anti-SAG1. Es por estos resultados que proponemos que la fusión de proteínas foráneas a la proteína LiHsp83 de L. infantum como una estrategia novedosa para incrementar los niveles de expresión de proteínas recombinantes expresadas en cloroplastos, proporcionando una alternativa a las dificultades que presenta la expresión de un antígeno en sistemas heterólogos de plantas.