Rol del complejo cdk5 / p35 en la morfología del aparato de Golgi

QUASSOLLO G., BISBAL M., PAGLINI G. Y CÁCERES A

Los Cocos, Córdoba, Argentina.

Congreso; XXII Reunión anual De La Sociedad Argentina De Investigación En Neurociencias.; 2007

Sociedad Argentina De Investigación En Neurociencias

<!-- /* Style Definitions */ p.MsoNormal, li.MsoNormal, div.MsoNormal {mso-style-parent:""; margin:0cm; margin-bottom:.0001pt; mso-pagination:widow-orphan; font-size:12.0pt; font-family:"Times New Roman"; mso-fareast-font-family:"Times New Roman"; mso-fareast-language:ES;} @page Section1 {size:612.0pt 792.0pt; margin:70.9pt 70.9pt 70.9pt 70.9pt; mso-header-margin:70.9pt; mso-footer-margin:70.9pt; mso-paper-source:0;} div.Section1 {page:Section1;} --> Implicancia (Rol) de CDK5/P35 en la cito-arquitectura del aparato de golgi en neuronas piramidales de hipocampo Quassollo G, Bisbal M , Paglini G, Caceres A. INIMEC – CONICET, Argentina.   Las neuronas son células altamente polarizadas que presentan asimetrías estructurales y funcionales; generadas y mantenidas por el citoesqueleto y por su transporte selectivo, activo y continuo de materiales desde el aparato de golgi, a sus destinos finales, los cuales son fundamentales para el mantenimiento de la morfología celular y su correcto funcionamiento. Recientes evidencias obtenidas por nuestro laboratorio muestran que en neuronas en desarrollo, la serina-treonina kinasa LIMKI regula la dinámica del aparato de golgi y promueve la axogenesis atraves del transporte selectivo de proteínas al cono de crecimiento a partir de esta novedosa localización subcelar. LIMKI regula el citoesqueleto de actina en el aparato de golgi fosforilando el sitio único, serina 3, del efector ADF-cofilina, inhibiendo su capacidad de unión a monómeros de actina y por ende su capacidad depolimerizante. LIMKI es un efector de PAKI (p21 acivated GTPase Kinase I), que se activa cuando esta asociado a pequeñas GTPasas como Rac y cdc42 activas. CDK5 (kinasa 5 dependiente de ciclinas) es una serina treonina kinasa con una importante funcion reguladora en la migración neuronal durante el desarrollo, y participa en la sinaptogenesis y neurotransmisión. Novedosas evidencias muestran que CDK5/P35 de manera RAC dependiente, tiene la capacidad de modular a PAKI. A partir de este creciente cuerpo de datos, decidimos estudiar si CDK5/P35 regula la dinamica de actina en el aparato de golgi y en consecuencia la citoarquitectura de esta organela. Para ello utilizamos Roscovitina, un inhibidor farmacologico específico para CDK5 que actua por competencia. En neuronas piramidales de hipocampo (7 DIV) tranfectadas con GALT2, un marcador de la porción cis y medial del aparato de golgi, y tratadas con Roscovitine, observamos una disminucion del área de esta organela respecto al grupo control. Células transfectadas con LIMKI KD (mutante deficiente en su actividad kinasa) y tratadas con roscovitina muestran un area de golgi incluso mayor que en los controles(indicando que esta kinasa se encuentra regulado aguas debajo de CDK5). Efectos similares se observaron cuando se sobreexpreso un activador específico de CDK5 como P35. Observamos que células tratadas con el inhibidor de CDK5 presentaban un aumento en los niveles de cofilina fosforilada y una disminución en los niveles de PAKI fosforilada. Apartir de estos resultados podemos decir que CDK5/P35 tiene un rol fundamental en la regulación de la arquitectura del aparato de golgi regulando la dinamica de actina atraves de la actividad de cofilina-LIMK1 modulando su efector aguas abajo PAK1    Comunicación: póster Área temática: biología celular y bioquímica