Metabolismo de pectinas durante la maduración de frutillas.

ROSLI, H; VILLARREAL, N; MARTÍNEZ, G; CIVELLO, P

Santa Rosa

Congreso; XXV Reunión Argentina de Fisiología Vegetal (RAFV).; 2004

SAFV

La pérdida de firmeza es una característica general de la maduración. Durante el ablandamiento, las pectinas (Fischer & Bennett, 1991) y las hemicelulosas (Lashbrook et al., 1997) sufren solubilización y depolimerización, las cuales contribuirían al desensamblaje de la pared celular. Esto cambios implican la acción coordinada de enzimas con la capacidad de degradar componentes específicos de la pared (Brummell & Harpster, 2001). La mayor parte de los estudios realizados incluyen poligalacturonasas (PGs), pectin metilesterasa, arabinofuranosidasa y β-galactosidasa. Se ha propuesto que estas dos últimas poseen la capacidad de reducir el tamaño de los polímeros pécticos mediante la hidrólisis de los residuos neutros de las cadenas laterales (De Veau et al., 1993). Las PGs catalizan la hidrólisis de las uniones α-(1,4) de los galacturonanos presentes en la pared celular.En el presente trabajo se seleccionaron frutos de dos cultivares de frutilla con distinto grado de firmeza, Camarosa (firmeza elevada) y Toyonaka (firmeza baja). Se clasificaron en estadios de maduración según tamaño y color superficial en: verde grande (VG), blanco (B), 25% rojo (25%R), 50% rojo (50%R) y 100% rojo (100%R). Con el objeto de continuar con el estudio del metabolismo de pectinas durante la maduración en dichos cultivares (Rosli et al., 2002) se obtuvo un residuo insoluble en alcohol a partir del cual se extrajeron pectinas solubles en agua (PSA) y HCl (PSH). Sobre cada una de estas fracciones se analizó el contenido de azúcares neutros para estimar el grado de ramificación de las pectinas.Debido a que el desensamblaje de pectinas ha sido asociado a la acción de PGs (Hadfield & Bennett, 1998), se procedió al análisis de la expresión (Northern blot y RT-PCR semicuantitativa) y actividad PGs.La relación azúcares neutros / ácidos urónicos en PSA fue mayor en Camarosa en los estadios VG y B, alcanzando niveles similares a los de Toyonaka en el 100%R. En la fracción PSH dicha relación mantuvo niveles constantes en los estadios VG y B, aumentando en el 100%R. Los resultados de los ensayos de Northern blot mostraron que en Camarosa la expresión comenzó en el estadio 50%R y aumentó marcadamente en el 100%R. En Toyonaka la expresión fue elevada desde el estadio B y se mantuvo hasta el 100%R. Con la técnica de RT-PCR semicuantitativa se obtuvieron resultados similares, detectándose además expresión en estadios más inmaduros.En ambas variedades se observó aumento de actividad PG a lo largo de la maduración. El mismo fue más marcado en Toyonaka, alcanzando valores que duplican a los de Camarosa hacia el final de la maduración.Estos resultados sugieren la existencia de una correlación entre los niveles de firmeza y la expresión y actividad PG en frutilla.