Inducción de Fenilalanina amonio-liasa en cultivo batch empleando Rhodosporidium toruloides

CASTAÑEDA, MARÍA TERESITA; HOURS, ROQUE A.; MIGNONE, CARLOS F.

Encuentro; VIII Encuentro Latinoamericano y del Caribe de Biotecnología (REDBIO); 2013

Fenilalanina amonio-liasa (PAL, EC 4.3.1.5) cataliza la desaminación no oxidativa de Lfenilalanina produciendo ácido t-cinámico. Esta enzima ha sido ampliamente estudiada por su empleo en el tratamiento de la fenilcetonuria. Se ha reportado previamente el papel de la L-fenilalanina en la inducción de PAL; sin embargo, hay pocos registros donde la inducción se realiza en fase estacionaria, en sistema batch. En este trabajo se cultivó Rhodosporidiumtoruloides IFO 0559 en sistema batch empleando un medio basal para crecimiento de levaduras. La inducción de PAL se realizó luego de agotada la fuente de carbono y energía mediante el agregado de: a) 0,5 g/l L-fenilalanina, b) 0,5 g/l L-fenilalanina + 5 g/l L-isoleucina y c) 0,5 g/l L-fenilalanina + 5 g/l L-isoleucina + 3 g/l sorbitol. Se monitorearon los cultivos registrando: crecimiento (OD660 y peso seco), pH, glucosa (g/l) y actividad específica PAL(mU/mg). Empleando únicamente L-fenilalanina se obtuvo un pico de actividad específica a las 3 h de iniciada la inducción. El agregado de L-isoleucina y de sorbitol resultó en un aumento en la biomasa pero no en actividad específica de PAL.