EXPRESIÓN GÉNICA DE TRANSPORTADORES DE ZINC EN EL COMPLEJO OVOCITO-CÚMULUS BOVINO: INFLUENCIA DE TRES HORMONAS REPRODUCTIVAS

PASCUA M; QUINTANA S; NIKOLOFF N; SIRINI MA; ANCHORDOQUY JP; ANCHORDOQUY JM; FURNUS CC

Ciudad Autónoma de Buenos Aires

Congreso; 3° Congreso Internacional de la SATE; 2016

Sociedad Argentina de Tecnologías Embrionarias

EXPRESIÓN GÉNICA DE TRANSPORTADORES DE ZINC EN EL COMPLEJO OVOCITO-CÚMULUS BOVINO: INFLUENCIA DE TRES HORMONAS REPRODUCTIVASPascua AM1, Quintana S2, Nikiloff N1, Sirini MA1, Anchordoquy JP1, Anchordoquy JM1, Furnus C11IGEVET, Instituto de Genética Veterinaria ?Ing. Fernando N Dulout? (UNLP-CONICET-CONICET LA PLATA), Facultad de Ciencias Veterinarias - UNLP, Calle 60 118, B1904AMA La Plata, Buenos Aires, Argentina2Instituto de Análisis Fares Taie, Rivadavia 3331, 7600 Mar del Plata, Buenos Aires, ArgentinaEl zinc (Zn) interviene en una amplia variedad de procesos celulares y su disponibilidad tiene influencia sobre distintos procesos reproductivos y en el desarrollo embrionario. Sin embargo, los mecanismos que regulan la homeostasis del Zn en el complejo ovocito-cúmulus (COC) y otras células del aparato reproductor, han sido poco estudiados. Para evaluar la entrada y salida de Zn a la célula es indispensable analizar la expresión de los transportadores de este micronutriente. En este sentido, se evaluó la expresión de ARNm de cuatro transportadores de Zn (ZIP 6 y Znt 3, 7 y 9) en ovocitos y células del cúmulus de bovino bajo la influencia de tres hormonas reproductivas: estradiol (E2), hormona folículo estimulante (FSH) y luteinizante (LH). Para ello, los COCs se maduraron in vitro durante 24 hs con los siguientes tratamientos: (1a) suplementación hormonal (E2 1µg/ml, FSH 1 µg/ml, LH 10 µg/ml) más el agregado de 120 µg/dl Zn (concentración normal) y (1b) suplementación sólo hormonal. Se realizaron controles de maduración sin hormonas: (2a) bajo suplementación con Zn, (2b) sin suplementación con Zn. Luego, se extrajo ARN, se lo digirió con DNAsa y se estudió mediante RT-PCR la presencia o ausencia de ARNm en ovocitos y células del cúmulus. Los resultados obtenidos muestran por primera vez la expresión del ARNm de los transportadores ZIP 6 y Znt9 en el ovocito bovino, mientras que en las células del cúmulus se expresan Znt 9 y Znt 3. No se detectó ARNm correspondiente a Znt 7 en ninguno de los de los tipos celulares mencionados. Los resultados de expresión correspondiente a cada tratamiento se muestran a continuación: Tipo celular T=0 de maduración CON hormonas SIN hormonas Con Zn Sin Zn Con ZnSin ZnZip6Ovocitos + - + + +Cúmulus - - - - -Znt3Ovocitos - - - - -Cúmulus - + - + -Znt7Ovocitos - - - - -Cúmulus - - - - -Znt9Ovocitos - - - + +Cúmulus - + - - -En conclusión, en cuanto a los ovocitos, no se registró expresión de ZIP 6 luego de la maduración con zinc bajo la acción de las hormonas estudiadas, y tampoco la de Znt 9 con suplementación hormonal, en presencia o ausencia de zinc. Por otra parte, en el cúmulus, Znt 9 no se expresó en ningún caso bajo acción hormonal, así como Znt 3 en ninguna situación de ausencia zinc. Vale destacar la expresión positiva de ZIP 6 ya en el ovocito inmaduro. Aunque estos estudios deben ser llevados a mayor profundidad mediante un análisis de expresión con discriminación de cada hormona agregada, estas diferencias sugieren que las hormonas reproductivas incidirían en la expresión génica de los transportadores estudiados.