Efecto del zinc sobre la integridad estructural y funcional de la membrana plasmática del espermatozoide bovino descongelado y su capacidad de unión a la zona pelúcida.

GALARZA E; ANCHORDOQUY JP; FURNUS C; MATTIOLI GA; FAZZIO LE; ANCHORDOQUY JM

Ciudad Autónoma de Buenos Aires

Congreso; 3° Congreso Internacional de la SATE; 2016

Sociedad Argentina de Tecnologías Embrionarias

Efecto del zinc sobre la integridad estructural y funcional de la membrana plasmática del espermatozoide bovino descongelado y su capacidad de unión a la zona pelúcida.Galarza E1,2, Anchordoquy JP2,3, Furnus C2, Mattioli GA3, Fazzio LE4, Anchordoquy JM2,31Lab. Nutrición mineral y fisiología reproductiva, UNLP, 2 IGEVET, Instituto de Genética Veterinaria ?Ing. Fernando N Dulout? (UNLP-CONICET-CONICET LA PLATA), Facultad de Ciencias Veterinarias - UNLP, Calle 60 118, B1904AMA La Plata, Buenos Aires, Argentina, 3Cat. Fisiología, Fac Cs Veterinarias, UNLP, 4Cat. Clínica de grandes animales, Fac Cs Veterinarias, UNLPEl zinc (Zn) es un mineral traza esencial involucrado en una gran variedad de procesos fisiológicos incluyendo la estabilidad de membranas celulares. La suplementación oral con este mineral en el bovino mejora el porcentaje de espermatozoides vivos y su motilidad individual. El objetivo del presente estudio fue evaluar el efecto de la suplementación con distintas concentraciones de Zn en el medio de fertilización in vitro (FIV) sobre la integridad estructural y funcional de la membrana plasmática del espermatozoide bovino descongelado, y su capacidad de unión a la zona pelúcida (ZP). El semen descongelado fue incubado en medio Fert-TALP conteniendo 0 (control); 0,4; 0,8; y 1,2 µg/ml de Zn en estufa gaseada a 39°C con 5% de CO₂ y humedad a saturación. Para evaluar la integridad (vitalidad espermática) y funcionalidad de la membrana se utilizó la técnica de coloración con eosina-nigrosina y la prueba de HOST (hypo-osmotic swelling test), respectivamente. El semen fue evaluado a las 0, 3 y 6 hs. Para evaluar la capacidad de unión de los espermatozoides a la ZP, el semen fue coincubado con ovocitos inmaduros desnudos por 2hs, luego los ovocitos fueron lavados y teñidos con Hoescht 33342. El conteo de espermatozoides unidos a la ZP se hizo con microscopio de epifluorescencia. Los datos de vitalidad y funcionalidad de la membrana fueron analizados con una regresión logística utilizando el procedimiento GENMOD (SAS Institute, Cary, NC). Los datos de unión de espermatozoides a ZP se analizaron mediante una regresión lineal mixta (SAS 9.0). Los resultados se muestran en la Tabla 1.Tabla 1. Efecto del zinc sobre la integridad estructural y funcional de la membrana plasmática del espermatozoide bovino descongelado y su capacidad de unión a la zona pelúcida. TratamientoVitalidad (%) Host (%) N° Espermatozoides 0 hs 3 hs 6 hs 0 hs 3 hs 6 hs unidos a ZPControl 82,6a 74,50bc 64,00e 39a 18,2b 17,5b 9,6 ± 4,8a0,4 µg/ml Zn 82,4a 74,87bc 67,12de36,7a 19,5bc 18,7bc 25,4 ± 5b0,8 µg/ml Zn 81,9a 77,50b 69,00cd 38a 24,7c 23,2c 42,1 ± 5,2c1,2 µg/ml Zn 82,9a 77,12b 71,00c40,7a 18,7b 19,7bc 16,9 ± 5,9abLos datos de Vitalidad son expresados como porcentajes [espermatozoides sin colorear (vivos)/ total].a-d son diferentes (P ˂0,05). Los datos de Host son expresados como porcentajes (espermatozoides reactivos/ total).a-c son diferentes (P ˂0,05).) Los datos de N° de Espermatozoides unidos a ZP (zona pelúcida) se expresan como el promedio ± ESM.a-c son diferentes (P ˂0,05).En conclusión, este estudio indica que el agregado de 0,8 µg/ml de Zn al medio de FIV favorece la integridad estructural y funcional de la membrana plasmática del espermatozoide bovino descongelado, y su capacidad de unión a la zona pelúcida.