Efecto de la suplementación con ácido eicosapentaenoico (EPA) sobre la maduración de ovocitos bovinos in vitro

NIKOLOFF N; ANCHORDOQUY JM; ANCHORDOQUY JP; SIRINI MA; PASCUA AM; FURNUS CC

Ciudad Autónoma de Buenos Aires

Congreso; 3° Congreso Internacional de la SATE; 2016

Sociedad Argentina de Tecnologías Embrionarias

Efecto de la suplementación con ácido eicosapentaenoico (EPA) sobre la maduración de ovocitos bovinos in vitroNikoloff, N; Anchordoquy J.M; Anchordoquy J.P; Sirini, M; Pascua, M; Furnus, C.noenik_@hotmail.comIGEVET, Instituto de Genética Veterinaria ?Ing. Fernando N Dulout? (UNLP-CONICET-CONICET LA PLATA), Facultad de Ciencias Veterinarias - UNLP, Calle 60 118, B1904AMA La Plata, Buenos Aires, ArgentinaEl estudio de las funciones de los ácidos grasos en el ovocito y las células del cúmulus (cc) que lo rodean, es esencial para comprender cómo alteraciones fisiológicas de los lípidos foliculares o del suplemento de lípidos como sustrato para el metabolismo del ovocito durante la maduración in vitro (MIV), impacta en las primeras etapas del desarrollo embrionario. Los ácidos grasos poli-insaturados (PUFAs) participan en funciones fisiológicas tales como el crecimiento, la reproducción, la visión y el desarrollo cerebral. En la actualidad, existe un interés creciente para comprender la influencia de la suplementación lipídica en los procesos reproductivos del ganado bovino. Sin embargo, es escasa y contradictoria la información acerca de los efectos de los PUFAs sobre la fertilidad y por consiguiente un área de urgente exploración. Por lo tanto, el objetivo del presente trabajo fue evaluar el efecto de EPA (PUFA n-3 20:5) sobre la MIV de ovocitos bovinos. Para tal fin, se determinó el área de expansión del cúmulus; la viabilidad celular con FDA y Azul de Tripán; la actividad mitocondrial mediante el ensayo colorimétrico de MTT y la maduración nuclear analizando la presencia de la Vesícula Germinal (VG), Metafase I (MI), Metafase II (MII) más corpúsculo polar y ovocitos degenerados (D) con Hoechst 33342. Se utilizaron complejos ovocito-cúmulus (COCs) de bovinos obtenidos a partir de ovarios de frigorífico. Se realizaron al menos tres réplicas por punto experimental y el número de COCs analizado por tratamiento fue: 20 COCs para evaluar expansión del cúmulus; 100 COCs para evaluar maduración nuclear; 1200 cc para evaluar viabilidad y 2 x 105 cc para evaluar MTT. Los COCs se maduraron in vitro y fueron tratados con concentraciones crecientes de 1 nM, 1 µM y 1 mM de EPA durante 24 horas. Los datos fueron analizados mediante el software Statgraphics 5.1 Plus. Se empleó ANOVA simple para analizar los datos de área de expansión, chi-cuadrado para datos de viabilidad y maduración nuclear y test de t para datos de MTT. Los resultados mostraron que: a) El área de expansión del cúmulus aumentó significativamente cuando los COCs fueron tratados con 1 nM (control=611615±58774 µ2; nM=88185±57225 µ2)(P