DIFERENCIACIÓN DE ESPECIES ARGENTINAS DEL GÉNERO SOLANUM MEDIANTE METABOLÓMICA POR RMN.

BRIGANTE FEDERICO; CHIARINI FRANCO; BARONI VERÓNICA; GARCÍA MANUELA

La Falda

Taller; V Taller Argentino de Resonancia Magnética; 2023

La quimiotaxonomía es la ciencia cuyo objeto es clasificar e identificar organismos según diferencias y similitudes en sus composiciones bioquímicas (1). Solanaceae es una familia de plantas muy importante desde el punto de vista económico, ya que incluye muchas plantas comestibles. Las especies de Solanum demuestran una biosíntesis predominante de metabolitos en particular alcaloides esteroidales (AEs) (2,3). Los AEs (glicosilados o libres) de Solanum están ganando un gran interés en diversas industrias farmacéuticas debido a su acción terapéutica (4).La metabolómica incluye estudios de una amplia gama de intermediarios metabólicos como lípidos, ácidos nucleicos, esteroides, vitaminas, y polifenoles entre otros (5,6). La estadística multivariada y métodos de machine learning son de especial importancia para la metabolómica. Se cuenta tanto con métodos exploratorios y clasificatorios para extraer información confiable de las muestras analizadas. Por otro lado, las técnicas de RMN aportan mucha información estructural a través de experimentos 1D y 2D y son capaces de medir todos los metabolitos abundantes en un solo espectro. Otras ventajas son la facilidad en la preparación de muestra, que suele ser mínima, y que el análisis es no destructivo y se lleva a cabo en tiempos relativamente cortos. Además, es posible obtener resultados confiables en equipos de rutina (400 MHz) (7). Ante la desventaja de la superposición de señales, se realizan experimentos como HSQC, HMBC, COSY, entre otros y algunas secuencias la metodología de Pure shift. El objetivo del presente trabajo es diferenciar a través de los extractos alcaloidales las especies del género Solanum mediante estudios metabolómicos por resonancia magnética nuclear de protón.En este trabajo, se recolectaron especies de Solanum de algunas regiones del país, se realizó un extracto total con etanol y una extracción selectiva de alcaloides en medio básico en hojas y frutos cuando estuvieran disponibles. Luego se tomaron los espectros de RMN en un equipo de 400 MHz y se prepararon muestras de control de calidad para controlar la dispersión instrumental. Luego, se procesaron los espectros usando el software MNova 14.2 (corrección de línea de base, fase, normalización, referenciado) y luego plataforma virtual MetaboAnalyst para análisis multivariados exploratorios y clasificatorios.Luego de la evaluación de aproximadamente 10 especies del género, un análisis de componentes principales del total de muestras (hojas, frutos y controles de calidad) mostró un 52,5% de la varianza total explicada entre las dos primeras componentes principales con buen agrupamiento de las muestras de control de calidad. Un análisis clasificatorio muestra la diferenciación de especies sin error de clase según señales en los espectros de RMN-1H correspondientes a diferentes estructuras de alcaloides esteroidales presentes en este género.En la actualidad, se están incluyendo más especies del género y se trabaja para hallar marcadores quimiotaxonómicos a nivel de clados.