Formación de biofilm en serogrupos de Escherichia coli productor de Toxina Shiga serogrupo O91

VELEZ, M.V; COLELLO, R.; ETCHEVERRÍA, A.I.; PADOLA, N.L.

Congreso; ALAM; 2021

Escherichia coli productor de toxina Shiga (STEC) es considerado un patógeno emergente transmitido poralimentos asociado a colitis hemorrágica (CH) y Síndrome Urémico Hemolítico (SUH). STEC ha sido reconocidacomo responsable de un alto número de casos de ETA a nivel mundial, siendo Argentina el país con mayorincidencia. Su habilidad para colonizar al huésped es esencial para la patogénesis. Existe un grupo de STECcarente del locus LEE (LEE-negativas) que no poseen los genes necesarios para producir la característica lesiónA/E, pero pueden poseer otros factores de virulencia adicionales, como aquellos presentes en el Locus deAdherencia y Autoagregación (LAA) que porta genes que participan en la adhesión y autoagregación, entreellos hes. Los biofilms son comunidades complejas de microorganismos que crecen embebidos en una matrizorgánica polimérica autoproducida y adherida a una superficie viva o inerte otorgándole a los microorganismosque lo conforma mayor resistencia ante procedimientos de desinfección y limpieza y facilitando la propagaciónde dichos patógenos. En los últimos años las cepas pertenecientes al serogrupo O91 han sido asociadas aenfermedad severa en el humano, sin embargo no se encuentran dentro de los protocolos de detección enArgentina. Se reconoce que la variabilidad de perfiles de virulencia de STEC provoca la emergencia de cepas confactores genéticos aún desconocidos. El objetivo de este trabajo fue estudiar la formación de biofilms de cepasSTEC O91 LAA-positivas. Se seleccionaron 16 cepas O91 LAA-positivas autóctonas aisladas de bovinos de tambo,bovinos de pastoreo y alimentos de origen avícola y dos cepas mutantes, una cepa O91 con la deleción de LAA(O91∆LAA), y una cepa O91 con deleción de hes (O91∆hes). Se realizó la formación de biofilm en placas de 96 wellsen tres eventos independientes y por triplicado. La capacidad de formar biofilms en cada cepa independientese estimó mediante tinción con Cristal violeta (0,1%) y lectura de densidad óptica (DO600). De acuerdo a las DOobtenidas, se clasifico a las cepas según su capacidad de formar biofilms en 4 categorías: no formadoras (NFB),débiles formadoras (DFB), moderadas formadoras (MFB), y fuertes formadoras de biofilms (FFB). Todas las cepasestudiadas (incluyendo las cepas mutantes) fueron clasificadas como FFB, aunque se observaron diferenciasentre las DO de las cepas mutantes y las cepas autóctonas que no fueron significativas, a excepción de unade las cepas autóctonas, aislada de bovinos que presentó una diferencia significativa (p>0.014) con respectoa las cepas mutantes. Estos resultados permitirían resaltar la función de adherencia de LAA, y confirmar quelas cepas O91 tienen una gran capacidad de formar biofilms. Consideramos importante tener en cuenta otrosserogrupos no-O157 que deben ser incluidos dentro del diagnóstico debido a que han sido asociados a CH ySUH. Comprender los mecanismos de patogenicidad de STEC y especialemte en la prevención de la formaciónde este tipo de biofilms es importante para disminuir el impacto de estos patógenos en la salud pública.