Contribucion de linfocitos intrahepaticos totales (LIH) y de la subpoblacion de celulas NKT en la induccion del perfil Th1 durante la infeccion por C. albicans

RENNA M.S; FIGUEREDO CM; RODRIGUEZ GALAN M.C; CORREA S.G; SOTOMAYOR C.E

La Falda, Cordoba

Congreso; LVI Reunion Cientifica de la Sociedad Argentina de Inmunologia y XI Jornada Cientifica del Grupo Rioplatense de Flujo; 2008

El objetivo del presente trabajo es estudiar el rol de los linfocitos intrahepaticos(LIH)en la induccion de la respuesta durante la etapa temprana de la infeccion por C.albicans (Th1 vs Th2) y la contribucion de linfocitos NKT en la induccion de esta respuesta. En la poblacion de LIH se estudio la produccion de INF-g e IL-4 en sobrenadantes de cultivo tanto en un sistema in vitro como ex vivo(ELISA). En los estudios in vitro, LIH purificados de animales Normales(N) se enfrentaron con el hongo (relacion 1/1), y luego de 24 hs de contacto se observo un aumento en la produccion de ambas citoquinas con respecto al basal sin el hongo (indice de incremento de INF-g: 16,53¡À3.54 y de IL-4: 2.21¡À0.26) indicando un desvio hacia el perfil de respuesta Th1. Para los estudios ex vivo, LIH purificados de animales N y animales infectados(Ca) se cultivaron en ausencia o en presencia del hongo (como reestimulo). Luego de 24 hs de cultivo, se observo que la produccion espontanea de INF-g en celulas de animales Ca es mucho mayor que la de animales N indicando un estado de "priming" hacia un perfil Th1 (indice de incremento: 24,50¡À6,36). Cuando estas celulas son reestimuladas con el hongo (relacion 1/1) no solo mantienen el perfil Th1 sino que ademas duplican la produccion de INF-g. Para evaluar la contribucion de las NKT se estudio la produccion intracelular de estas citoquinas por citometria de flujo(FACS) en ambos sistemas. Cuando LIH de un animal N se enfrentan con el hongo 24 hs se observa un aumento en el porcentaje de NKT productoras de INF-g (¨indice de incremento con respecto al basal: 7,3¡À2) y un aumento en el canal medio de fluorescencia (43,46 vs 60,41; p<0,05), de manera interesante celulas NKT productoras de IL-4 no presentaron este comportamiento, indicando asi un desvio hacia el perfil Th1. Cuando LIH provenientes de un animal Ca se dejan 24 hs en cultivo se observa un mayor porcentaje de NKT productoras de ambas citoquinas pero con una tendencia nuevamente hacia Th1. Como control positivo para ambos sistemas se estimulo a las celulas con esteres de forbol(PMA) e ionomicina obteniendose una maxima produccion de INF-g e IL-4(ELISA) y un maximo porcentaje de celulas NKT productoras de ambas citoquinas(FACS) sin un balance hacia un tipo u otro de respuesta. Estos resultados muestran la contribucion de los LIH y dentro de ellos las NKT en la induccion de una respuesta Th1 luego de la infeccion por C.albicans, lo que podria contribuir al control intrahepatico de este hongo oportunista.