DISTRIBUCION DE INTERMEDIARIOS DE LA SINTESIS DE GANGLIOSIDOS Y GLICOSILTRANSFERASAS EN MEMBRANAS DEL COMPLEJOS DE GOLGI

CRESPO, PILAR; ZURITA, ADOLFO; MACCIONI H.J.F; DANIOTTI, JOSE LUIS

V. Gral. Belgrano, Córdoba, Argentina

Congreso; SBC; 2003

Sociedad de Biología de Córdoba (SBC)

Los gangliósidos son glicolípidos cuya síntesis se inicia en el retículo endoplásmico y finaliza en el complejo de Golgi mediante la acción de un conjunto de glicosíltransferasas que catalizan la elongación del oligosacárido. Recientemente hemos descripto la presencia de algunas especies de gangliósidos en microdominios ricos en glicolípidos y colesterol (GEM) de membrana plasmática de células CHO-K1. Estos dominios GEM se caracterizan por ser resistentes a la extración con detergente no iónico y poseer baja densidad. Mediante técnicas de extracción con Tritón X-100 en frío y gradientes en sucrosa, investigamos si los gangliósidos precursores y las glicosiltransferasas están presentes en microdominios GEM en el complejo de Golgi. Los resultados obtenidos indican que los gangliósidos precursores y tres glicosíltransferasas estudiadas resultaron ser solubles a la extracción con Tritón X-100. Además, demostramos que gangliósidos tales como GM3, GD3 y GT3 son luego incorporados a dominios GEM. Mediante microscopía confocal observamos que el gangliósido GD3 distribuye sobre la membrana plasmática de células CHO-K1 en dominios resistentes a la extracción con Tritón X-100 y que en su mayor proporción no colocalizan con una proteína unida a membrana vía GPI, presente también en dominios GEM.   Nuestros resultados sugieren que glicosiltransferasas y gangliósidos recientemente sintetizados localizan fuera de dominios GEM en el complejo de Golgi, en tanto determinadas especies de gangliósidos son posteriormente incorporados a dominios GEM en alguna de las etapas de la vía secretoria.   Financiado por: Foncyt, HHMI, F. Antorchas y Ministerio de Salud de la Nación