PLATAFORMA DE NANOPARTICULAS DE ORO EN UN SENSOR BIOANALITICO PARA LA DETERMINACIÓN DE ANTICUERPOS Ig-G ANTI-ECHINOCOCCUS GRANULOSUS

PEREIRA SV.; FENÁNDEZ BALDO M.; DANIEL M. REGIART; GERMÁN A. MESSINA; JULIO RABA

Santa Fe

Congreso; VI Congreso Argentino de Química Analítica; 2011

Asociación Argentina de Químicos Analíticos

Título: PLATAFORMA DE NANOPARTICULAS DE ORO EN UN SENSOR BIOANALITICO PARA LA DETERMINACIÓN DE ANTICUERPOS Ig-G ANTI-ECHINOCOCCUS GRANULOSUS Autores: Pereira, Sirley V.; Fernandez Baldo, Martin; Regiart, Daniel M.G.; Messina, Germán A.; Raba, Julio. Lugar: INQUISAL, Departamento de Química, Facultad de Química, Bioquímica y Farmacia, Universidad Nacional de San Luis, Chacabuco 917, San Luis, Argentina. E-mail: spereira@unsl.edu.ar Área Temática: Química Bioanalítica Palabras Claves: Hidatidosis, sensor bioanalítico, E. granulosus, electrodo modificado, nanopartículas Resumen: El propósito de este trabajo fue desarrollar un inmunosensor microfluídico para la cuantificación de anticuerpos IgG anti-E. granulosus, agente causal de Hidatidosis [1]. Esta enfermedad parasitaria posee considerable impacto en la salud humana y animal generando importantes pérdidas socioeconómicas en áreas endémicas [2]. La posibilidad de realizar un diagnóstico temprano es de gran relevancia, permitiendo el manejo y tratamiento adecuado de los pacientes que la padecen [3]. La detección de anticuerpos fue llevada a cabo mediante un inmunoensayo no competitivo, en el cual los antígenos de E. granulosus fueron inmovilizados sobre la superficie de un electrodo de oro, previamente modificado a través de la incorporación de nanopartículas de oro, como estrategia para incrementar la sensibilidad del dispositivo. Los anticuerpos presentes en las muestras de suero reaccionaron inmunológicamente con dichos antígenos y posteriormente fueron cuantificados utilizando un segundo anticuerpo marcado con la enzima peroxidasa de rábano picante (HRP) y catecol (Q) como mediador enzimático. HRP en presencia de peróxido de hidrógeno H2O2 cataliza la reducción de Q a o-benzoquinona (P). La reducción electroquímica de P fue detectada sobre la superficie del electrodo de oro a-0,15 V. La corriente obtenida como respuesta a la reducción del producto de la reacción enzimática fue directamente proporcional a la actividad enzimática y consecuentemente a la concentración de anticuerpos de tipo IgG anti E. granulosus en muestras de suero [4]. La detección electroquímica se realizó dentro de 1 minuto y el tiempo total del ensayo fue de 29 minutos. Los límites de detección calculados para la detección electroquímica fueron de 0.091 ng ml-1, con coeficientes de variación intra e inter ensayo menores a 6,8 %. Los resultados obtenidos demostraron el potencial de la metodología propuesta, para ser empleada en el diagnóstico serológico de esta enfermedad endémica de reconocida importancia en salud pública y en el ámbito agropecuario. Bibliografía: [1] Pereira S.V., Bertolino F.A., Messina G.A., Raba J., Microfluidic immunosensor with gold nanoparticle platform for the determination of immunoglobulin G anti-Echinococcus granulosus antibodies, Analytical Biochemistry 409 (2011) 98–104. [2] Schantz P.M., Parasitic zoonoses in perspective, Int. J. Parasitol. 21 (1991) 161–170. [3] Dalimi A., Ghasemikhah R., Hashemi Malayeri B., Echinococcus granulosus: lethal effect of low voltage direct electric current on hydatid cyst protoscoleces, Exp. Parasitol. 109 (2005) 237–240. [4] Ruan C., Li Y., Detection of zeptomolar concentrations of alkaline phosphatase based on a tyrosinase and horseradish peroxidase bienzyme biosensor, Talanta 54 (2001) 1095–1103.