Regulación estrogénica de la expresión del factor neurotrófico derivado del cerebro (BDNF) en el hipocampo

MORENO PIOVANO GS; J. VARAYOUD; M. MUÑOZ DE TORO; E.H. LUQUE; J.G. RAMOS

Hotel 13 de Julio, Mar del Plata, Bs. As., Argentina

Congreso; LIII Reunión anual de la SAIC; 2008

Sociedad Argentina de Investigación Clinica (SAIC)

En  un  trabajo  previo  demostramos  que  el  período  de  tiempo  que  una  hembra  permanece castrada  antes  de  recibir  una  terapia  estrogénica  exógena  (menopausia  experimental), determina  la  capacidad  de  los  estrógenos  de  inducir  o  no  la  expresión  de  BDNF  en  el hipocampo.  El  objetivo  de  este  trabajo  fue  conocer  los  mecanismos  moleculares  que determinan  este  proceso.  Ratones  hembras  adultas  ovariectomizadas  (OVX)  fueron  tratadas diariamente  por  1  semana  con  1.75mcg  de  estradiol (E2)  luego  de  2  semanas  (CPE)  o  de  7 meses de realizada la OVX (LPE). Los controles respectivos se inyectaron con aceite (CPC y LPC),   sacrificándose   todos   los   animales   a   la   misma   edad   cronológica.   La   actividad transcripcional en el hipocampo de los distintos promotores del gen de BDNF se evaluó por RT-PCR  en  tiempo  real  y  los  niveles  de  metilación  de  regiones  regulatorias  de  este  gen  se analizaron  mediante  PCR  específica  de  metilación  y  por  análisis  combinado  de  bisulfitación-restricción de ADN. Luego del tratamiento con estradiol los animales que pasaron poco tiempo castrados  antes  de  comenzar  su  terapia  estrogénica  (CPE)  mostraron  un  aumento  en  la actividad de los promotores 2, 4 y 5 (P<0.001) del gen de BDNF, mientras que en los ratones LPE  sólo  el  promotor  2  presentó  un  leve  incremento  (P<0.05).  Al  estudiar  los  niveles  de metilación de secuencias regulatorias del gen de BDNF en los distintos grupos experimentales, se observó que los animales LPE presentaban mayores niveles de metilación en una isla CpG ubicada entre -140 y -60 pb del promotor 5 (p<0.01) y en el sitio regulatorio CRE ubicado a -37pb  en  el  promotor  4  (p<0.05).  Estos  resultados  indican  que  el  tiempo  que  un  animal  pasa privado de sus hormonas ováricas (menopausia experimental) es crítico para lograr un efecto neurotrófico por parte de una terapia hormonal de reemplazo basada en estrógenos exógenos. Estos eventos se deberían, al menos en parte, a modificaciones epigenéticas del gen BDNF.