Validación de la transcripción de un gen asociado a la actividad antioxidante de Yerba Mate (Ilex paraguariensis)

FAY J.V.; L. TALAVERA STEFANI; C. PERCUCO; C. ROJAS; C. ARGÜELLES; M. MIRETTI

Posadas

Jornada; X Jornadas Científico-Tecnológicas de la Facultad de Ciencias Exactas, Químicas y Naturales de la Universidad Nacional de Misiones; 2015

FCEQyN-UNaM

La fenilalanina amonio-liasa (PAL: Phenylalanine ammonia-lyase) es una enzima codificada por una familia multigénica en la mayoría especies estudiadas, en Arabidopsis thaliana fueron mapeados cuatro genes PAL1 - PAL4. Esta enzima cataliza la primera etapa en la ruta de fenilpropanoides y está asociada a la actividad antioxidante observada en Yerba Mate con reconocido impacto en salud humana. PAL es inducible y responde a estrés biótico y abiótico (agentes patógenos, irradiación, temperatura, humedad. Para conocer la actividad funcional de esta enzima no es suficiente con identificar los genes que la codifican, es necesario cuantificar la expresión génica y validarla experimentalmente. En un estudio previo hemos identificado la primera secuencia de un gen de PAL en Ilex paraguariensis (YM). El objetivo es este trabajo fue ampliar el tamaño de fragmento del gen PAL previamente identificado y validar la expresión en YM. Para ello se obtuvo ARN de plántulas de YM que fue utilizado como molde para la amplificación con cebadores específicos mediante RT-PCR. Los productos de RT-PCR fueron visualizados con geles de agarosa, purificados y su secuencia de ADN obtenida mediante secuenciación capilar. La secuencia del fragmento adicional identificado en este trabajo ha sido comparado con la información disponible en bases de datos. La retrotranscripción positiva valida la actividad del gen PAL en YM. Estos resultados demuestran la presencia de un gen PAL funcional en YM. Estos datos son relevantes para los análisis de actividad de transcripción diferencial del gen PAL en respuesta a ensayos que contrasten la incidencia de factores de estrés.