El ácido retinoico promueve la diferenciación de neuronas fotorreceptoras de retina in vitro

DE GENARO, P; ROTSTEIN, NP; POLITI, LE

Buenos Aires

Congreso; VI Congreso de la AIVO; 2009

AIVO

La vitamina A juega un papel crucial en el desarrollo y funcionamiento del ojo. Sus metabolitos más importantes son el Retinal, que junto con la proteína opsina forman el pigmento visual, y el Ácido Retinoico (AR). Trabajos previos sugieren que el AR intervendría en el desarrollo inicial de la retina y en la maduración de los fotorreceptores (FR); sin embargo, aún se desconocen sus efectos sobre aspectos específicos del desarrollo de estas neuronas. En este trabajo analizamos los efectos del AR sobre el desarrollo de los FR de rata in vitro. Metodos:Utilizamos cultivos neuronales de retinas de ratas recién nacidas, desarrollados en medios químicamente definidos, tratados o no (control), con AR todo-trans. A distintos tiempos del desarrollo se analizó la expresión de marcadores de los FR, como el factor de transcripción Crx, opsina y periferina/rds, y del marcador de neuronas amacrinas HPC-1. Además, se investigó el desarrollo de neuritas, la incorporación de Bromodeoxiuridina (BrdU) y el nivel de fosforilación de p38-MAPK por métodos inmunocitoquímicos y Western Blot.   Resultados: Mientras que en cultivos controles solo una pequeña proporción de células expresó opsina, los valores aproximadamente se duplicaron en cultivos tratados con AR. A su vez, el AR incrementó en los FR el desarrollo de procesos apicales, la expresión de periferina, el número y longitud de las neuritas así como en los niveles de fosforilación de p38-MAPK, quinasa que participa en la fosforilación y activación de los receptores de AR. Por otro lado, el AR no afectó la progresión del ciclo celular ya que no modificó los niveles de incorporación de BrdU, ni el número de FR que expresaron Crx.  Estos resultados sugieren que en nuestras condiciones de cultivo y a estos tiempos del desarrollo el AR no regularía la proliferación ni promovería la diferenciación de neuroblastos en FR. El AR actuaría una vez abandonado el ciclo celular, promoviendo la diferenciación de los FR durante su desarrollo temprano, siendo la vía de la p38-MAPK una de  que activaría para ejercer sus efectos sobre los FR.   CONICET, ANPCYT y UNS