OBTENCIÓN Y ANÁLISIS FILOGENÉTICO DE UNA SECUENCIA DE FENILALANINA AMONIO LIASA DE MANÍ (Arachis hypogaea L.)

TONELLI, MARÍA LAURA; TAURIAN, TANIA; IBANEZ, FERNANDO; FABRA, ADRIANA

La Plata

Congreso; XXVIII Reunión Argentina de Fisiología Vegetal; 2010

La fenilalanina amonio liasa (PAL, EC 4.3.1.5) es la primer enzima en la biosíntesis de fenilpropanoides. Los estudios  sobre la caracterización y expresión de genes PAL en leguminosas son escasos. El objetivo de este trabajo fue obtener una secuencia del gen PAL de Arachis hypogaea L. var. Runner cultivar Tegua y analizar su filogenia. Se diseñaron los cebadores PALf y PALr a partir de secuencias pal de las leguminosas Stylosanthes humilis, Pisum sativum, Phaseolus vulgaris L, Trifolium subterraneum  y Glycine max. A partir de ADN genómico de maní, se amplificó por PCR el fragmento de 370 pb esperado (AhPAL), a partir del cual fueron determinadas la secuencia de núcleótidos y su secuencia deducida de proteínas. Ambas secuencias mostraron elevados niveles de similitud con genes y proteínas PAL de otras especies vegetales. Particularmente, la secuencia génica de este fragmento mostró 80% de identidad con la secuencia de nucleótidos del gen PAL de A. hypogaea cultivar JL24 y 88% de similitud con su secuencia de aminoácidos. Sin embargo, en el análisis filogenético incluyendo las secuencias de nucleótidos de otros genes PAL de plantas monocotiledóneas y dicotiledóneas, las secuencias pal de ambos cultivares de maní no se agruparon juntas. Esto sugiere que estos genes codifican diferentes isoformas de PAL, que probablemente evolucionaron por divergencia luego de un evento de duplicación génica. El hecho de que las dos únicas secuencias pal de A. hypogaea disponibles se agrupen con genes PAL de otras plantas leguminosas y no leguminosas y no entre ellas, sugiere que probablemente el evento de duplicación que dio origen a estas hipotéticas isoformas ocurrió luego de la separación entre monocotiledóneas y dicotiledóneas, pero antes del origen de las Fabaceaes.