VACUNA FORMULADA CON LA NUCLEOPROTEINA VIRAL RECOMBINANTE Y EL ADYUVANTE C-DI-AMP, ADMINISTRADA POR VIA SUBCUTANEA A RATONES, PROTEGE FRENTE A LA INFECCION CON DISTINTOS SUBTIPOS DE INFLUENZA

SANCHEZ, MARIA VICTORIA; EBENSEN, THOMAS; SCHULZE, KAI; CARGNELUTTI, DIEGO ESTEBAN; IBAÑEZ,ITATÍ; CALDEVILLA, CECILIA; SCODELLER, EDUARDO ALBERTO; GUZMAN, CARLOS ALBERTO

Buenos Aires

Congreso; XII Congreso Argentino de Virología; 2017

Sociedad Argentina de Virología

La gripe es una enfermedad respiratoria producida por el virus de influenza, con un alto impacto anual en términos de morbilidad y mortalidad. Las vacunas antigripales utilizadas actualmente se basan en la inducción de respuestas humorales, anticuerpos frente a las proteínas de superficie virales altamente cambiantes, que no son totalmente capaces de proteger contra nuevas variantes antigénicas y nuevos virus emergentes. La formulación de vacunas incluyendo antígenos conservados virales y nuevos adyuvantes capaces de inducir fuertes respuestas celulares, puede ser una valiosa estrategia para el desarrollo de una vacuna universal. En este estudio, se evaluó la eficacia de una vacuna formulada con la nucleoproteína viral recombinante (NPr) combinada con el adyuvante agonista de STING, bis-(3',5')-adenosina monofosfato cíclico (c-di-AMP), administrados por vía subcutánea en ratones.Grupos de ratones BALB /c fueron inmunizados en los días 1 y 21 con solución salina, NPr sola, y NPr+c-di-AMP. En el día 42, las respuestas inmunes humorales y celulares fueron evaluadas. La respuesta inmune humoral antígeno específica fue evaluada en suero por medición del título de anticuerpos IgG total e IgG subtipos, por ELISA. La respuesta inmune celular fue evaluada en cultivo de esplenocitos de los ratones inmunizados, luego de la re-estimulación antígeno específica. Para la evaluación de los perfiles inmunológicos inducidos por la vacunación se realizó: ELISPOT para la cuantificación de las células productoras de IFN-γ, IL-2 (perfil Th1) e IL-4 (perfil Th2); citometría de flujo para evaluar los linfocitos T productores de citoquinas intracelulares IL-2, TNF-α, IFN-γ, IL-4. En el día 50 se realizó un ensayo de citoxicidad in vivo con CFSE. En el día 60, los grupos inmunizados fueron desafiados con virus de influenza A/PuertoRico/8/34 (H1N1) y A/Hong Kong/1/68 (H3N2). Luego de la infección, se controló la pérdida de peso de los animales durante 2 semanas. La formulación NPr+c-di-AMP, confirió una eficaz protección a ratones desafiados con dosis letales de los subtipos de influenza H1N1 y H3N2, comparada con la NPr sin adyuvante. La protección se correlacionó con altos títulos de anticuerpos antígeno específicos, IgG total (4x105) e IgG subtipos, IgG1 (8,9x105) e IgG2a (4,8x105), comparadas con la inmunización con la NPr sola, con títulos de IgG (1,8x105), IgG1 (3,6x105) e IgG2a (1,84x104). La formulación NPr+c-di-AMP indujo una respuesta fundamentalmente del tipo Th1, evidenciada por una alta presencia de células productoras principalmente de IFN-γ e IL-2, y corroborada por alta frecuencia de células T CD4+ productoras de IL-2, TNF-α, e IFN-γ. Además, la formulación NPr+c-di-AMP indujo fuertes respuestas citotóxicas in vivo, evidenciada por la lisis significativa de células presentadoras de antígeno (CD19 y CD11c).Este estudio demostró que el uso del nuevo adyuvante c-di-AMP, puede aportar una ventaja significativa en el desarrollo de una vacuna universal.