Rol de la SUMOilación en la variación antigénica en Trypanosoma brucei.

MELINA A. SERASSIO GOZZI; PAULA A. IRIBARREN; VANINA E. ALVAREZ

Buenos Aires

Otro; XXXIII Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Protozoología; 2022

Sociedad Argentina de Protozoología

La SUMOilación de proteínas es una modificación post traduccional que involucra la unión covalente de una proteína con homología estructural a ubiquitina llamada SUMO a residuos de lisina de distintas proteínas blanco. En nuestro modelo de estudio, Trypanosoma brucei, se ha demostrado que la SUMOilación de proteínas estaría implicada en procesos clave para la vida del parásito como son la diferenciación y la variación antigénica. Para el estudio de este último mecanismo, desarrollamos una línea de parásitos sanguíneos pleomórficos que expresan de manera inducible un sistema de ARNi dirigido hacia la glicoproteína variable de superficie (VSG) expresada por los parásitos. Observamos que, tal como se ha descripto anteriormente para parásitos monomórficos, la interferencia de la expresión de VSG da como resultado el arresto del ciclo celular, lo que conduce a la muerte de los parásitos y permite seleccionar aquellos que hayan cambiado la expresión de su VSG hacia una nueva variante. Esta línea celular nos permitió analizar el efecto del tratamiento con anticuerpos dirigidos hacia la VSG expresada sobre la frecuencia de variación antigénica. Observamos que, luego del tratamiento con anticuerpos, la frecuencia de variación antigénica, calculada mediante un test de fluctuación (método P0), se encontraba incrementada. Durante el estadio sanguíneo de T. brucei las proteínas SUMOiladas se encuentran concentradas en un foco extranucleolar llamado HSF el cual regula positivamente la expresión de VSG. Dicho HSF colocaliza con el complejo encargado de la transcripción de la VSG activa, llamado ESB, el cual se encuentra enriquecido en ARN pol I. Para estudiar la dinámica de SUMOilación durante el switching transfectamos la línea que expresa el ARNi dirigido hacia la VSG con un plásmido que posee una variante de la ARN pol I marcada. De esta manera podremos estudiar que ocurre con el HSF y el ESB durante la variación antigénica.