Relevamiento de las comunidades de roedores en distintos ambientes de la ciudad de Mercedes y alrededores (Provincia de Buenos Aires) y estudio de la prevalencia e infección por hantavirus

ADDUCI, LUCIANA; BELLOMO CARLA; BUSCH, MARÍA; FERNANDEZ, M.SOLEDAD; FRASCHINA, JIMENA; GOMEZ VILLAFAÑE ISABEL; GUIDOBONO, J.SANTIAGO; LEÓN, VANINA A.; MANABELLA SALCEDO IRIS; MARTINEZ V; VAZQUEZ L

2017-03-01/2017-05-30

1-10

Biológica

Produccion animal

ANTECEDENTESAnte la ocurrencia de dos casos de síndrome pulmonar por hantavirus las autoridades municipales del partido de Mercedes (Provincia de Buenos Aires) solicitaron al Laboratorio Nacional de Referencia para Hantavirus (INEI- ANLIS) y al Laboratorio de Ecología de poblaciones de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales (UBA) la realización de un relevamiento de las comunidades de roedores en distintos ambientes de la ciudad de Mercedes y alrededores. Con el objetivo de evaluar los riesgos potenciales para la población derivados del contacto con roedores, se propuso describir las especies presentes, su abundancia, la seroprevalencia de hantavirus y detectar la presencia de genoma viral. Los roedores involucrados en la transmisión del hantavirus que causa el síndrome pulmonar por hantavirus en humanos pertenecen al grupo de los sigmodontinos, roedores nativos de la región y que ocupan principalmente hábitats silvestres, con buena cobertura vegetal. En particular, en la zona de estudio el reservorio del hantavirus que causa enfermedad en humanos es Oligoryzomys flavescens, aunque también está presente Akodon azarae, reservorio del hantavirus Pergamino, que hasta ahora no ha sido asociado a casos humanos de la enfermedad. MÉTODOS: 1.Captura de roedores. Para realizar las capturas de roedores se seleccionaron sitios de acuerdo a dos criterios principales: riesgo de transmisión a humanos y ambientes favorables para el establecimiento de roedores sigmodontinos. De acuerdo al primer criterio se muestreó en el Corralón Municipal, enfrente a la fábrica Cores, en el Parque Municipal Nuevo y cerca del Parque Municipal viejo (en las cercanías de donde se produjeron los casos de Síndrome Pulmonar por hantavirus), de acuerdo al segundo criterio se muestreó en los alrededores de la chacra Las Chancles (calles 11 y 178) y cerca del basural viejo (La Florida). Detalles de los sitios muestreados se pueden observar en las figuras adjuntas. Las capturas se realizaron mediante trampas Sherman de captura viva (8 x 9 x 23 cm), que capturan pequeños mamíferos (hasta aproximadamente 100 g de peso), aunque ocasionalmente pueden capturarse ratas juveniles. Las trampas se instalaron el 16/5/17, y fueron revisadas los días 17, 18 y 19/5. Este último día fueron retiradas, lavadas y desinfectadas. El período de 3 días de trampeo se utiliza frecuentemente para pequeños roedores, ya que se estima que en ese lapso se captura más del 80% de la población. Las trampas fueron cebadas con una mezcla de grasa vacuna, pasta de maní y avena arrollada y en su interior se colocó un algodón como material de anidamiento. En total se colocaron 202 trampas, totalizando un esfuerzo de captura de 604 trampas noche. Las trampas con captura fueron colocadas en bolsas de nylon individuales con la identificación del sitio de captura y fueron trasladadas al sitio donde se realizó el procesado de roedores. El traslado de animales se realizó en la caja posterior de una camioneta, a fin de evitar posibles contactos con el personal.Para el procesado de los animales el personal trabajó con equipode bioseguridad: trajes de Tyvek, máscara de protección respiratoria, guantes y botas de goma. Posteriormente a anestesiar los animales mediante isoflurano (anestésico inhalatorio) se registraron los siguientes datos: sitio y fecha de captura, especie, sexo, estado reproductivo, peso, largo total y largo de cola. Se tomaron muestras de sangre, pulmón e hígado. Fueron sacrificados mediante dislocamiento cervical. Las muestras de sangre y pulmón fueron conservadas en un termo de nitrógeno líquido, a -80?C hasta su traslado en hielo seco al instituto I.N.E.I.- A.N.L.I.S. ?Dr. C. G. Malbrán? para las determinaciones serológicas y virales. Las muestras de hígado fueron conservadas en alcohol etílico para posteriores análisis genéticos. Al finalizar el procesado todo el material fue desinfectado y los residuos potencialmente patogénicos fueron trasladados para su desecho en la Municipalidad de Mercedes. Estimación de abundancia de roedores: Se calculó un índice de abundancia relativa al esfuerzo de muestreo, o Éxito de captura, para cada sitio de muestreo, como:(# de individuos capturados/(# trampas*# noches)) x 100, se descontaron las trampas que no fueron repuestas luego de una captura.2. Determinación de seroprevalencia y presencia de genoma viral Se recibieron y procesaron 71 muestras de sangre de roedores (muestra absorbida en papel) por medio de un ensayo de ELISA, para la detección en sigmodontinos de anticuerpos IgG específicos contra hantavirus. Resultaron positivas las muestras Nº02 Akodon azarae, Nº20 A. azarae, Nº 45 A. azarae, Nº71 A. azarae, Nº76 A. azarae y Nº68 Oligoryzomys flavescens.A partir de las muestras de pulmón de los roedores seropositivos, se realizó una extracción de ARN total y una amplificación específica del ARN viral por medio de una RT-PCR anidada. Con el material obtenido, se realizó una secuenciación y análisis del genoma viral.