Acción de antimicrobianos en células de biofilm de Proteus mirabilis

V. AIASSA, A.I. BARNES, I. ALBESA

Buenos Aires

Congreso; I Congreso Latinoamericano de Microbiología de Medicamentos; 2005

Asociación Argentina de Microbiología

La producción de biofilm condiciona a las bacterias a numerosos cambiospudiendo observarse una distribución no homogénea de las célulasbacterianas en la trama del biofilm. Las células de biofilm sufren cambiosmetabólicos que le permiten evadir los mecanismos de defensa del huésped yser menos afectadas por la acción de diferentes antimicrobianos. El géneroProteus comprende bacilos Gram negativos caracterizados por producirswarming y frecuentemente reconocidos como agentes causales de patologíainfecciosa relacionada a pacientes con hipertrofia de próstata y lesiones deriñón que requieren sonda vesical por tiempos prolongados. Objetivos:investigar la susceptibilidad de cepas de Proteus mirábilis en biofilm frente aCirpofloxacina (Cip) y a Imipenem (Imp) comparada con la sensibilidad quepresentan en estado libre o planctónico. Materiales y métodos: Se estudiarondos cepas de P.mirabilis 1A y 2A de origen clínico. Se usaron membranasfiltrantes Millipore (diámetro 25 mm, tamaño del poro, 0,2 um) esterilizadas enautoclave. Las membranas fueron inoculadas con 0,5 ml de un cultivonocturno diluido a 0,200 (densidad óptica 600 nm) y se cultivaron en AgarTripteina Soya (ATS) , transfiriendo las membranas a placas nuevas de ATScada 24 horas, por 48 horas. Los biofilm fueron expuestos a placas de AgarMueller Hinton (AMH) conteniendo Imp: 160 ug/ml (10 CIM) y Cip: 40 ug/ml(10 CIM), durante 2, 4 y 24 horas. Las células planctónicas fueron cultivadasen Caldo Müeller Hinton con las mismas concentraciones de antibióticos ytiempos descriptos. Se determinaron las unidades formadoras de colonias porml (UFC/ml) a los tiempos preestablecidos por siembra en ATS y seexpresaron los resultados como logaritmo de UFC/ml. En los biofilm se evaluóla degradación de los antibióticos a concentraciones 2 y 10 CIM mediante unnuevo bioensayo con Eschearicha coli. Resultados: Los biofilm de ambascepas mostraron frente a Imp muy poca variación del log de UFC/ml a las 2 y4 horas de exposición, la cepa A2 evidenció una caída de 1,61 unidades delog UFC/ml frente a Imp. Frente a Cip se observó una disminución menor a 1unidad de log de UFC/ml en los biofilm de las 2 cepas a las 24 horas mientrasque los recuentos bacterianos de las células plantónicas expuestas 24 horas aambos antibióticos fueron negativos. Ambas cepas (A1 y A2) no presentarondesarrollo de E. coli en la zona de AMH donde se formó el biofilm indicandoque la actividad antibiótica a 10 CIM y a 2 CIM no sufrió cambio significativo.Conclusiones: El biofilm afecta marcadamente la sensibilidad de las células alos antibióticos estudiados durante un tiempo de exposición prolongado(24horas). No se observó degradación de los antibióticos a concentracionessupra CIM por las células de biofilm de las dos cepas estudiadas.