Efectos in vitro del Cannabidiol (CBD) sobre la quimiotaxis y sobrevida de polimorfosnucleares (PMN) humanos

JERÓNIMO AUZMENDI; MATEO CONTI SGUIER; CLAUDIO CARBIA; ALBERTO LAZAROWSKI; AMALIA MERELLI

Mendoza

Congreso; XXIV Congreso Argentino de Hematologia; 2019

Sociedad Argentina de Hematologia

En la última década ha crecido considerablemente el interés por el tratamiento de diversas patologías con cannabinoides. Entre las decenas de compuestos obtenidos de plantas del género Cannabis, la atención se ha focalizado sobre dos compuestos Δ9-tetrahidrocannabinol (THC) y cannabidiol (CBD). Si bien ambos poseen un potencial rol terapéutico, CBD no posee el efecto psicotrópico de THC, lo que lo convierte en el compuesto más apto para su uso farmacológico. Se ha postulado que CBD tiene un efecto anti inflamatorio que sería, al menos en parte, responsable de su acción terapéutica. Los pacientes que consumen crónicamente compuestos derivados de los cannabis suelen enfrentar infecciones recurrentes, lo que nos indujo a investigar si CBD podría ejercer algún efecto sobre la funcionalidad de los polimorfosnucleares neutróficlos(PMN). Para esto se utilizaron muestras de individuos sanos con hemogramas normales a partir de las que se aislaron los PMN por el método de Ficoll-hypaque, los cuales fueron resuspendidos en RPMI a una concentración final de 1.25x106 PMN/ml. La viabilidad fue controlada mediante la Técnica colorimétrica de Trypan blue y se admitió un cut off de 95%. Las curvas de dosis-respuestas y sobrevida se realizaron incubando los PMN a 37º C por 1 hora con concentraciones de CBD en el rango 10-7 ? 10-3 M. La morfología fue examinada en extendidos coloreados con May Grunwald - Giemsa post centrifugación en un cito-spin. Los experimentos de quimiotaxis se realizaron en cámara de Boyden usando FMLP 10-7M como quimioatractante de referencia (100%) y filtro de pdv con un tamaño de poro de 3 µm. Las células fueron incubadas 1 hora a 37º C en atmósfera de 5% CO2, en presencia de diferentes concentraciones de CBD. Finalmente se contabilizaron aquellas células que migraron a través del filtro con un contador hematológico SYSMEX (XNSSO). El CBD (10-3 M) redujo la viabilidad de los PMN en un 50% luego de una hora de incubación, mientras que a concentraciones micromolares no se observó ningún efecto. A bajas concentraciones el CBD no mostró alteraciones morfológicas significativas con respecto a los neutrofilos normales, sin embargo el incremento en la concentración de CBD aumentó paulatinamente las alteraciones morfológicas caracterizadas por vacuolización citoplasmática, núcleos con aspectos pseudo-madurativos, degranulación y ruptura de membrana citoplasmática. Paralelamente el efecto de CBD en la sobrevida de los PMN fue dependiente del tiempo para concentraciones bajas, mostrando una disminución en el número de células del 35% a las dos horas de tratamiento en comparación al control. Adicionalmente la quimitaxis de los PMN fue fuertemente inhibida a bajas concentraciones de CBD. Conclusión. Si bien al CBD se le atribuyen propiedades antiinflamatorias, nuestros resultados sugieren un potencial efecto negativo en la capacidad quimiotáctica de los PMN como en su propia sobrevida, hecho que podría afectar su función inmunoprotectora.