Identificación de Glicoproteína-P en estadíos larvarios de Echinococcus sp.

ANDREA C. CUMINO; MARÍA CELESTE NICOLAO; GUILLERMO M. DENEGRI

Mar del Plata

Congreso; LIV Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC); 2009

Sociedad Argentina de Investigación Clínica y Sociedad Argentina de Inmunología

Las enfermedades parasitarias crónicas provocadas por helmintos afectan a los continentes más poblados del planeta. La echinococcosis quística producida por los estadios larvarios de Echinococcus granulosus (Eg), es una de las enfermedades parasitarias de mayor importancia socioeconómica con amplia distribución mundial, sin una efectiva estrategia quimioterapéutica. Se ha demostrado un elevado efecto protoescolicida en Eg interfiriendo las funciones del ión calcio en sus diferentes niveles de regulación celular (Cumino et al., 2009). Estos fármacos presentan una estructura molecular diferente (esteroides, bloqueantes de los canales de calcio, opiáceos, anticancerosos, antibióticos y antipsicóticos), todos compuestos hidrófobos, posibles sustratos o inhibidores de la glicoproteínaP (Pgp). El objetivo de este trabajo es identificar Pgp en Eg, fosfoglicoproteína de transmembrana de la superfamilia de transportadores ABC, producto de expresión del gen mdr (multidrug resistance) que media el eflujo celular de drogas lipofílicas. Hemos identificado dos genes mdr en E. multilocularis (http://www.sanger.ac.uk/, contigs 0001877 y 0001914) y uno en Eg  (EST EgCV679218 mdr1) cuyas secuencias de aminoácidos deducidas codifican proteínas con 75-90% de homología en sus dominios de transmembrana (con afinidad por ligandos lipofílicos) y citoplasmáticos (de unión a ATP). En protoescólices de Eg caracterizamos funcionalmente dicha proteína mediante determinaciones fluorométricas (fluoroskanII y microscopía confocal) en experimentos in vivo con calceína-AM y determinamos los niveles de expresión de mdr1 a nivel transcripcional y traduccional en condiciones basales y bajo tratamiento farmacológico, demostrándose altos niveles de expresión en el cestode, coincidente con la expresión en células secretorias e indiferenciadas como en otros metazoos. Estos resultados contribuirán a interpretar resultados de efectividad terapeútica en experimentos in vitro e in vivo con éstos fármacos.