EFECTO DEL ÁCIDO α-LIPOICO SOBRE EL DESARROLLO IN VITRO DE EMBRIONES BOVINOS

IZQUIERDO I; CARRANZA A; CAMPAGNA A; FARNETANO N; NIKOLOFF N; FURNUS C

Simposio; 13th Simposio Internacional de Reproducción Animal.; 2019

El embrión requiere energía para su desarrollo y la obtiene del O2, ATP y NADPH.Sin embargo, la producción de energía genera especies reactivas de oxígeno (ERO) que afectan negativamente los procesos reproductivos. Altos niveles de ERO en el ambiente celular acumulan estrés oxidativo, produciendo daño en el ADN y apoptosis celular.Se ha estudiado encélulas de mamífero queelácido α-lipoico (AAL) tiene poder antioxidante. El objetivo del presente trabajo fue estudiar el efecto de AAL durante el cultivo in vitro(CIV) de embriones bovinos sobre las tasas de clivaje (CLI), blastocistos (BL) y hatching. Para ello, se utilizó la técnica de producción de embriones in vitroque consta de tres etapas: maduración de ovocitos, fertilización in vitro (FIV) y CIV. Los complejos ovocito-cúmulusde bovinose obtuvieron partir de ovarios de frigorífico y se maduraron 24h en medio TCM199 con suero bovino fetal y hormonas. Los ovocitos madurados se fertilizaron con semen congelado de un toro de probada fertilidad en medio Fert-TALPsuplementado con 6mg/ml BSA-FAF. Luego de la FIV los presuntos cigotos se cultivaron durante 8 días a 39°C, humedad a saturación y baja tensión de oxígeno (7% O2, 5% CO2 y 88% N2) en medio SOFmcon 8mg/ml BSA- FAF suplementado con distintas concentraciones de AAL [0 µM AAL (Control); 5 µM AAL (AAL5) y 25µM AAL (AAL25); 100 µM AAL (AAL100)]. Los resultadosobtenidos mostraron que (Tabla 1): a)las tasas de CLI del Control, AAL5 y AAL25 fueron similares (P > 0.05). Sin embargo, el porcentaje de CLI disminuyó significativamente cuando AAL100 estuvo presente en el medio de CIV (P < 0.05); b)la tasa de BL se redujo a medida que aumentó la concentración de AAL en el medio de CIV. Las diferencias fueron significativas cuando se compararon los porcentajes de BL de AA5; AA25 y AA100 (P< 0.05). Los porcentajes de BL, fueron similares en el Control yAAL5 (P > 0.05); c)no se encontraron diferencias entre los tratamientos cuando se evaluó la tasa de hatching(P > 0.05). En conclusión, el AAL en bajas concentraciones no modificó la tasa de blastocistos mientras que las concentraciones más altas podrían ser perjudiciales para el desarrollo embrionario temprano bovino. Queda evaluar la calidad y el estatus antioxidante de los embriones obtenidos.Tabla 1: Efecto de distintas concentraciones de AAL durante el desarrollo preimplantacional de embriones bovinos cultivados in vitro.TratamientoOvocitos (n)CLI (%)BL(%)Hatching (%)Control8679.18±7.2a24.50±6.9a16.7±4.2ªAAL510079.30±6.2a18.76±5.4ab15.0±4.7aAAL259273.97±7.4ab13.41±7bc16.7±5.2ªAAL1008768.13±8.1b9.55±4.5c5.0±3.5a(a,b,c) Diferentes letras indican P