Prueba piloto para la validación de una técnica no invasiva de medición de tumores trasplantados en ratones inmunodeficientes

CARRANZA A; RESASCO A; VERCELLINI C

La Plata

Jornada; XXIII Jornadas de Jóvenes Investigadores de la Asociación de Universidades Grupo Montevideo; 2015

El objetivo de este trabajo es realizar un estudio comparativo entre las mediciones obtenidas con calibre de Vernier y las conseguidas con una técnica no invasiva.MATERIALES Y MÉTODOSAnimalesSe utilizaron 6 ratones hembra libres de patógenos específicos (SPF) del stock N:NIH(S)-Fox1nu, de 6 semanas de edad, provenientes del bioterio de la Facultad de Ciencias Veterinarias de la UNLP. AlojamientoLos animales se alojaron en las salas de experimentación del bioterio de la Facultad de Ciencias Veterinarias, UNLP en un rack ventilado marca Lab Products. Los animales se mantuvieron en cajas de polipropileno transparentes de 18 x 29 x 13 cm, con lecho de viruta de madera de álamo de 1 x 1 x 0,5 mm, agua de bebida en mamaderas y alimento extrusado rata/ratón marca Cooperación suministrado ad libitum. Todos estos insumos fueron autoclavados. Las cajas se cambiaron una vez por semana. Los ratones se mantuvieron con aire filtrado a través de filtros absolutos HEPA, a una temperatura ambiente de 22+2 ºC, 40?60 % de humedad relativa, 15 renovaciones de aire por hora y un fotoperiodo de 10 hs oscuridad y 14 hs luz. Células tumoralesLos tumores provienen de la línea celular de adenocarcinoma de pulmón humano (A549) y se obtuvieron a partir de tumores producidos en otros ratones y que se mantienen en el laboratorio hace 6 años mediante trasplantes subcutáneos sucesivos. Medición de los tumoresLos volúmenes tumorales se obtienen a partir de la fórmula 1/2xLargoxAncho2 (Tomayko et al, 1989). Para la medición de tumores con calibre de Vernier se realizó primero una sujeción manual de los ratones por la piel laxa del cuello y la cola con la mano no diestra y con la otra mano se realizó la medición del tumor Para la medición no invasiva de los tumores se utilizó un tubo de acrílico de sección cuadrada con una hoja milimetrada desplegada en el centro del mismo. Este tubo se coloca dentro de la caja donde se alojan los ratones y éstos ingresan al tubo por su propia voluntad a medida que exploran el nuevo objeto. En este momento se toman fotografías que luego se analizan con el programa de computadora ImageJ tomando como escala la hoja milimetrada La diferencia de las mediciones entre el calibre de vernier y la digital no fueron estadísticamente significativas (0,450+0,12 vs. 0,457+0,13, respectivamente; p