Acido alfa lipoico (AAL) mejora la criotolerancia a la vitrificación de embriones producidos in vitro

FABRA M; ANCHORDOQUY P; CAMPAGNA A; CARRANZA A; FARNETANO N; ANCHORDOQUY M; FURNUS C; NIKOLOFF N

La Plata

Jornada; Jornada de Investigación 2022; 2022

Los avances en la producción in vitro (PIV) y transferencia en reproducción asistida humana y enanimales de interés ganadero exigen que se optimicen las técnicas de crioconservación embrionaria. El objetivo fue evaluar el efecto antioxidante de AAL durante las primeras 24 h de CIV sobre la calidad del embrión bovino, la competencia de desarrollo y la criotolerancia después de lavitrificación. Se utilizaron ovocitos de ovarios de frigorífico sometidos a las etapas de PIV en unaatmósfera gaseada (5% CO2; 39 °C; 7% O2). Los tratamientos utilizados fueron AAL 0 µM(Control) y AAL 2.5 µM en medio CIV durante las primeras 24 h. Se evaluaron tasa de clivaje 48 h post FIV, clasificando clivados de 2 a 4 células (2-4c) y de más de 4 células (>4c); blastocistos al Día 7-8 (B7-B8) y blastocistos totales (BT). Los grados de calidad de los embriones se verificaron según la clasificación de la IETS vitrificándose solo blastocistos grado 1, utilizando el dispositivo de superficie Cryotech®. Los blastocistos se vitrificaron después de la PIV. Luego del proceso de calentamiento, se evaluó la reexpansión a las 3 h y la tasa de eclosión a las 24, 48 y 72 h. También se evaluó la producción de EROs en embriones calentados. De un total de 1113 ovocitos se obtuvieron 313 embriones: a) Las tasas de 2-4c no difirieron entre el Control y AAL (P = 0,37). b) La tasa de BT aumentó con AAL (P = 0,01) debido a un aumento en la tasa de B7 (P = 0,002). Se clasificaron un total de 195 embriones según IETS, vitrificándose 133 embriones los días 7 y 8 de CIV: c) Aumentó en el total de embriones vitrificados en AAL comparado con Control (P = 0,01) al día 7. d) Las tasas de reexpansión 3 h después del calentamiento no difirieron en los días 7 y 8 (P = 0,35 y P = 0,48). e) No se observaron diferencias en la tasa de eclosión entre AAL y Control a las 24 h. Sin embargo, se observó un aumento en la tasa de eclosión del grupo Control a las 48 h del día 7 y 8 (P = 0,05; P = 0,03 respectivamente) y a las 72 h del día 8 (P = 0,05). f) Los niveles intracelulares de EROs, se redujeron en el grupo AAL el día 7 (P = 0,05). Se concluye que la suplementación con AAL al medio de CIV durante 24 h mejoró la tasa y la calidad de los blastocistos y podría actuar como protección embrionaria en las técnicas de vitrificación.