Efecto combinado del manganeso, selenio, cobre y zinc sobre el desarrollo preimplantacional bovino y la calidad embrionaria in-vitro.

ANCHORDOQUY JM; FARNETANO N; CARRANZA A; NIKOLOFF N; FABRA M; FURNUS C; ANCHORDOQUY JP

Ciudad Autonoma de Buenos Aires

Jornada; VI Jornadas Internacionales, Instituto de Investigacion y Tecnologia en Reproducción Animal, INITRA; 2021

Previamente hemos demostrado que el agregado de cobre (Cu), manganeso (Mn), selenio (Se)o zinc (Zn) durante la maduración in vitro (MIV) de ovocitos bovinos incrementa su capacidadde desarrollo posterior hasta el estadio de blastocisto. Sin embargo, aún no se ha estudiado cuáles el efecto de la suplementación combinada de estos minerales durante la MIV. El objetivo delpresente trabajo consistió en estudiar el efecto de la suplementación con Cu, Mn, Se y Zndurante la MIV sobre la tasa de clivaje y de blastocisto y el número de células, el contenido delípido y de especies reactivas del oxígeno (ERO) en el blastocisto bovino. Para tal fin, seutilizaron complejos ovocito-cúmulus (COC) obtenidos a partir de ovarios de frigorífico. LosCOC se maduraron in vitro durante 24 hs a 39°C en atmósfera gaseada al 5% de CO2 en medioTCM 199 suplementado con 10 % de SFB. En cada réplica (n=4), los COC fueron maduradosen dos condiciones; 1) medio de MIV sin el agregado de minerales (grupo control), y 2) mediode MIV suplementado con 600 ng/mL Cu + 6 ng/mL Mn + 100 ng/mL Se + 400 ng/mL Zn(grupo minerales). Luego de la MIV los ovocitos fueron fecundados in vitro en medio Fert-Talp. Los presuntos cigotos se cultivaron en medio SOF modificado durante 8 días. La tasa declivaje se evaluó a las 48 horas luego de la fecundación in vitro y la tasa de blastocistos en eldía 8 de cultivo. El número total de células por embrión se evaluó mediante la tinción deHoechst 33342. El contenido de lípidos y ERO se realizó mediante la técnica de Nile Red yH2DCFDA, respectivamente. En todos los casos se utilizaron blastocistos expandidos. La tasade clivaje y blastocisto fue analizada mediante regresión logística. El número de células y elcontenido de lípidos y ERO (ambos estimados como unidades de intensidad de fluorescencia)se analizaron mediante un modelo lineal. Se consideró significativa a un valor de p ≤ 0,05. Losresultados demostraron que el agregado combinado de Mn, Se, Cu y Zn al medio de MIV: a) nomodificó la tasa de clivaje (90,61 vs 94,30% para control y minerales, respectivamente); b)incrementó la tasa de blastocistos (34,25 vs 50,60% para control y minerales, respectivamente),c) incrementó el número de células por embrión (110,8 ± 9,7 vs 187,5 ± 10,5 para control yminerales, respectivamente); d) disminuyó el contenido de lípidos (54,72 ± 2,9 vs 45,17 ± 3,0para control y minerales, respectivamente) y e) redujo las ERO del embrión (48,63 ± 5,3 vs23,83 ± 4,1 para control y minerales, respectivamente). En conclusión, la suplementación conCu, Mn, Se y Zn durante la MIV mejoró el desarrollo preimplantacional y la calidadembrionaria en el bovino.