VALIDACIÓN DE UNA TÉCNICA ANALÍTICA PARA LA DETERMINACIÓN DE LA PUREZA ENANTIOMERICA DE SULFATO DE R-SALBUTAMOL

HALABI ALEJANDRA; PALACIOS SARA,; PALACIO MARCELA; FERRAYOLI CARLOS

Buenos Aires, Argentina

Congreso; IX Congreso Argentino de Farmacia y Bioquímica Industrial; 2002

Asociación Argentina de Farmacia y Bioquímica Industrial

Introducción: El sulfato de salbutamol es un derivado del b-aminoalcohol empleado como broncodilatador en el tratamiento del asma1. Es una droga que presenta isomería óptica y se comercializa como mezcla racémica. Sólo el isómero R presenta dicha acción, por esa razón, en nuestro laboratorio hemos desarrollado a escala laboratorio y piloto, una metodología para obtener selectivamente el sulfato de R-salbutamol.2, 3 Para seguir el proceso de purificación y controlar el producto obtenido, se desarrolló una técnica para la cuantificación y determinación de la pureza enantiomérica por Cromatografía Líquida de Alta Presión (HPLC), empleando una columna quiral para la separación de los enantiómeros Objetivo: Desarrollar y validar una técnica por HPLC para la cuantificación y determinación de la pureza enantiomérica del sulfato de R-salbutamol en materia prima. Materiales y Método: Equipo: Waters Alliance 2690. Detector DAD 996. Columna: Chirobiotic T de glicopéptido Teicoplanin unido covalentemente a silicagel 5mm de ASTEC (Advanced Separation Technologies Inc.), de 250 x 4,6 mm con precolumna de 40 x 4,6 mm. Fase Móvil: ACN/ MeOH/ Ac. Acético glacial/ Trietilamina 60: 40: 0,3: 0,2 v/v respectivamente, a un flujo de 1,5 ml/min, a temperatura ambiente, con detección UV a 276 nm y volumen de inyección de 10 ml. Estándares de R y S sulfato de salbutamol: obtenidos y caracterizados en Ceprocor Resultados: El método desarrollado permitió la separación de los isómeros R y S y la determinación de la pureza enantiomérica y cuantificación del isómero R. Como parte de la validación, se determinaron, según las recomendaciones de ICH (International Conference of Harmonization): la robustez, mediante un diseño de Plackett-Burman modificando acidez de la fase móvil, flujo y temperatura de la columna; la especificidad, en presencia de posibles productos de degradación surgidos durante el procesamiento; la linealidad, empleando para las curvas de calibrado los estándares R y S por separado y también mezclas; la exactitud empleando mezclas de los isómeros (R/S: 20/80; 50/50; 99,5/0,5); la estabilidad de las soluciones a temperatura ambiente (luz, oscuridad) y heladera, y la precisión, evaluando la repetibilidad del sistema, la precisión intermedia entre días y entre operadores. El método mostró ser robusto, específico, los coeficientes de correlación obtenidos para las curvas de calibrado fueron superiores a 0,999. Los porcentajes de recuperación hallados fueron entre 99,2 y 101,9%. Se comprobó que las soluciones de la droga son estables al menos durante 10 días a temperatura ambiente. La precisión en términos de la repetibilidad arrojó un %RSD menor al 1% y la precisión intermedia menor al 2%. Conclusiones: Consideramos que la técnica analítica es válida para determinar la pureza enantiomérica del sulfato de R-salbutamol, ya que las características analíticas evaluadas se ajustan a las recomendaciones establecidas por ICH.  Referencias: 1- “New class of selective stimulants of b-adrenergic receptors” D. Hartley, D. Jack, L. H. C. Lunts, A. C. Ritchie. Nature. 219, 861-2 (1968). 2-  “Optical resolution of racemic albuterol by diasteromeric salts formed with di-p-toluoyl-D-tartaric acid.”            C. G. Ferrayoli, M. Palacio, M. F. Bressina, S. M. Palacios. Enantiomer, 5, 289-91 (2000). 3- “Proceso para la producción de salbutamol ópticamente puro.” CEPROCOR-ACC. Autores: S. M. Palacios, C. G. Ferrayoli, M. Palacio. Patente en trámite. Acta  N° 359.