Identificación de los pigmentos oscuros del hongo fitopatógeno Cladosporium fulvum Raza 2 Cidefi 300, agente causante del moho de la hoja de tomate.

LUCENTINI C.G.; PETROSELLI GABRIELA; ERRA BALSELLS ROSA; TRONCOZO M.I.; FRANCO E.; MEDINA R.; ROLLAN C.; BALATTI PEDRO; SAPARRAT MARIO

Lima

Congreso; 9º Congreso Latinoamericano de Micología (IX CLAM); 2017

Las melaninas son pigmentos oscuros sintetizados por un amplio espectro de organismos. Estos polímeros, que son químicamente complejos, cumplen roles de protección ante estreses, son factores de virulencia en la patogénesis y además tienen propiedades de interés en el área médica e industrial. Cladosporium fulvum, perteneciente a la familia Mycosphaerellaceae (Capnodiales), es el agente causante del moho de la hoja de tomate. Esta enfermedad es una problemática en el cinturón hortícola platense (Argentina), que a la fecha solo se ha asociado a dos razas del hongo. C. fulvum como otros hongos dematiáceos se caracteriza por desarrollar micelio y esporas pigmentados. A pesar que este hongo ha sido estudiado en profundidad no está claro el tipo de melanina que sintetiza. El objetivo de este trabajo fue detectar la vía de síntesis de melanina en el aislamiento CIDEFI 300 (Raza 2) a través del cultivo en un medio basal agarizado (agar-glucosa-extracto de papa, APG, control) y en la presencia de diferentes concentraciones de inhibidores específicos de melanina-(3,4-dihidroxifenilalanina) DOPA y -(1,8 dihidroxinaftaleno) DHN y piomelanina (ácido kójico, triciclazol y sulcotriona respectivamente) y/o de inductores de la pigmentación (DOPA y tirosina) e identificar los intermediaros claves utilizando MALDI-TOF MS (Matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry). Solo variaciones en la pigmentación de las colonias en asociación con la acumulación de cromóforos anaranjados en el medio se observaron cuando el hongo fue crecido en la presencia de triciclazol a 50 ppm. La extracción de los metabolitos intermediaros en acetato de etilo a partir del micelio desarrollado en el medio con 50 ppm de triciclazol condujo a la identificación de flaviolina, un producto de autoxidación del 1,3,8-trihidroxinaftaleno (1,3,8-THN), un intermediario clave en la síntesis de la melanina-DHN. Puesto que este metabolito no se detectó en extractos derivados de cultivos control, estos resultados confirman la naturaleza DHN de la melanina de este hongo.