El endosulfán afecta la descondensación de la cromatina del núcleo espermático de ratón

SANCHEZ, M.; LO NOSTRO, F.; ROMANATO, M.; JULIANELLI, V.; CALVO, L.; CALVO, J.C.; FONTANA, V.

Mar del Plata

Congreso; Reunión científica SAIC, SAFIS y SAFE; 2013

Justificación La descondensación de la cromatina espermática es requisito para la singamia y requiere la tiorreducción de disulfuros de protaminas asociadas al ADN y el intercambio con histonas ovocitarias. Pesticidas como el endosulfán podrían alterar este proceso. Objetivos Evaluar en sistema murino el efecto del endosulfán sobre la descondensación de la cromatina espermática. Metodología Se obtuvieron espermatozoides epididimarios de ratones CF-1, y se incubaron con concentraciones crecientes de endosulfán puro o formulado (100 pM a 100 µM), usando medio o DMSO como controles. Para evaluar la descondensación, se incubaron 1-2 x106 espermatozoides con Heparina y GSH durante distintos tiempos a 37 °C en 5% CO2. Se fijaron con glutaraldehído al 2% y se determinó en microscopio con contraste de fase el porcentaje de espermatozoides descondensados. Se analizó el estado redox de las protaminas asociadas al DNA espermático incubando con endosulfán (100 µM) y medio o DMSO utilizando el reactivo monobromobimane (mBBr), observando con microscopio de fluorescencia y analizando con el programa Image J. Los experimentos se realizaron por duplicado evaluando 200 células en cada muestra. Resultados y conclusiones El endosulfán puro produce un aumento significativo de la descondensación cuando los espermatozoides se incuban con una concentración de 1 µM y 100 µM (p