Microscopía óptica

FALOMIR L; FEDERICO FUENTES

Análisis estructural y funcional de macromoléculas

Editorial de la Universidad Nacional de La Plata (EDULP)

Lugar: La Plata; Año: 2013; p. 354 - 406

La microscopía es un conjunto de técnicas que se ha desarrollado por más de300 años, que incluyen distintas metodologías altamente especializadas. Seclasifican en 3 grandes grupos: La Microscopía Óptica, la MicroscopíaElectrónica y la Microscopía por Sondas. Este capítulo está centrado enpresentar una serie de técnicas incluidas dentro de la Microscopía Óptica quepermiten estudiar procesos bioquímicos y biofísicos hasta a nivel(sub-)micrométrico, es decir a nivel de tejidos, celular, subcelular, o inclusomolecular. Una de las grandes ventajas de la microscopía es que se puedenemplear los mismos fenómenos físicos, descritos en capítulos anteriores parael análisis de biomacromoléculas in vitro, pero ahora incorporando tambiéninformación espacial, en particular, en relación a las estructuras biológicasrelevantes de cada sistema en estudio, como la estructura de un tejido, lacélula, el núcleo, organelas, etc..Desde sus inicios a mediados del siglo XVII, el microscopio ha sufrido grandescambios. Inicialmente limitado al espectro electromagnético de la luz visible alojo humano, en las últimas décadas se han desarrollado técnicas que empleanun espectro extendido, que hoy abarca desde los rayos-X hasta el infrarrojolejano, gracias al desarrollo de detectores específicos que reemplazan al ojodel observador. Por practicidad, este capítulo se enfocará exclusivamente enlas técnicas de Microscopía Óptica, es decir, nos limitaremos al espectro visibleligeramente extendido hacia el UV y el IR; mientras que dejaremos de lado ladescripción del microscopio electrónico y otras variantes. Por otro lado, junto 355con al desarrollo de detectores especializados, se incorporó también ladigitalización de las imágenes, potenciando así las posibilidades de análisis.Hoy en día, comprender y prever el modo de análisis de las imágenesobtenidas es, al menos, igual de importante que el diseño del ensayo en sí através del cual se registrarán las mismas. Por tal motivo, se urge a losinteresados a explorar los distintos programas disponibles según su interés onecesidad.No se desarrollarán en este texto las descripciones correspondientes a lastécnicas de Microscopía Electrónica o por Sondas, quedando tambiénpendientes sus comparaciones e integración con las técnicas de MicroscopíaÓptica pendientes para futuras ediciones.